原発性胆汁性肝硬変の胆管病変におけるエネルギー代謝の解析と治療戦略

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26460416
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 原田 憲一 金沢大学, 医学系, 教授 (30283112)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 原発性胆汁性胆管炎 / ピルビン酸脱水素酵素複合体 / 慢性非化膿性破壊性胆管炎 / 解糖系 / 脂肪酸代謝系 / エストロゲン関連受容体

研究実績の概要

原発性胆汁性胆管炎(PBC)で出現するピルビン酸脱水素酵素複合体(PDC)に対する自己抗体(AMA)の出現および慢性非化膿性破壊性胆管炎(CNSDC)による胆管消失の発生機序について、PDCに関連する解糖系エネルギー代謝について解析した。ヒト胆管細胞を樹立後、血清減量にてperoxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1α (PGC-1α)発現を誘導するとエストロゲン関連受容体α(ERRα)の発現亢進とともに、PDC酵素活性の負の調節因子pyruvate dehydrogenase kinase(PDK)の発現、さらにPDC酵素活性の低下を来たし、胆管細胞における解糖系エネルギー代謝の低下を示した。またcarnitine palmitoyltransferase 2(CPT2)などの脂肪酸代謝系関連酵素の発現亢進および酸化ストレスの亢進によるアポトーシス感受性亢進が見られ、解糖系エネルギー代謝減弱に対して代償性に脂肪酸代謝系への変換が起こっていると推測された。またPBC肝組織における障害胆管では、PGC-1α,ERRα, PDK4,CPT2,8OH-dG(酸化ストレスマーカー)の発現亢進が見られ、CNSDCにおける解糖系から脂肪酸代謝系へのエネルギー代謝の変換さらには酸化ストレス亢進によるアポトーシスの誘導が亢進しているが示唆された。また、本年度は上記のエネルギー代謝変換にて生じる酸化ストレスが肝細胞ではどのような影響を及ぼすかを検討するため、ヒト肝細胞の培養への取り組みを行った実験に供する程度の精製度および細胞数を得ることができなかった。したがって、現在 ヒト肝細胞癌および胆管癌の培養細胞を入手し、富ミトコンドリア性等の肝細胞としてて特徴を検討している。今後、エネルギー代謝変換にて生じる酸化ストレス誘導性の細胞障害および回避機序を解析することによる新規治療法への開発へと準備をしている。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

理由　本年度の研究内容として、脂肪酸代謝系への偏位によるアポトーシス誘導のPDC抗原性の解析を掲げたが、新規のヒト正常胆管細胞およびヒト正常肝細胞の供与ができず正常細胞を用いての検討ができなかった。本問題を解決するため、ヒト胆管癌および肝細胞癌の培養株を数種類入手し、本研究に適した培養細胞を選択中である。来年度は、癌細胞を用いて本研究を遂行することができる。

今後の研究の推進方策

現時点では使用する培養細胞が変更になる予定であるが、研究全体としての大きな方向転換は不要である。本研究課題の申請時の内容に沿って研究を完了できる予定である。来年度は、脂肪酸代謝系の変異によるアポトーシス誘導のPDC抗原性の解析、またPGC-1/ERRα誘導機序の解析、PGC-1/ERRαとエストロゲン効果との関連性、PGC-1/ERRαと胆道系自然免疫応答と関連性について解析し、PBCを特徴付ける女性発症、ミトコンドリア抗体(AMA)やPDC抗体の産生機序およびPBCの病因としての胆道感染症の関与について解析を進める。また、PBCの重要な病期進展因子として明らかとなってきた肝炎性変化(肝細胞障害)についても注目し、肝細胞でも同様な検討を行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Inflammatory Features of Pancreatic Cancer Highlighted byMonocytes/Macrophages and CD4+ T cells with Clinical Impact. (2015)
  • 著者名/発表者名: Komura T, Sakai Y, Harada K, Kawaguchi K, Takabatake H, Kitagawa H, Wada T, Honda M, Ohta T, Nakanuma Y, Kaneko S.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 106(6) ページ: 672-86
  • DOI: doi: 10.1111/cas.12663.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Growth arrest and DNA damage-inducible 34 regulates liver regeneration in hepatic steatosis in mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Inaba Y, Furutani T, Kimura K, Watanabe H, Haga S, Kido Y, Matsumoto M, Yamamoto Y, Harada K, Kaneko S, Oyadomari S, Ozaki M, Kasuga M, Inoue H.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 61(4) ページ: 1343-56
  • DOI: doi: 10.1002/hep.27619.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Autophagy and senescence in fibrosing cholangiopathies (2015)
  • 著者名/発表者名: Yasuni Nakanuma, Motoko Sasaki, Kenichi Harada.
  • 雑誌名: Journal of Hepatology 巻: 62 ページ: 934-945
  • 査読あり
• [雑誌論文] A variant of multicystic biliary hamartoma presenting as an intrahepatic cystic neoplasm. (2015)
  • 著者名/発表者名: Teｔsuro Tominaga, Takafumi Abo, Naoe Kinoshita, Tomonori Murakami, Yasunori Sato, Yasuni Nakanuma, Kenichi Harada, Junichi masuda, Takeshi Nagayasu,Atsushi Nakashima.
  • 雑誌名: Clin J Gastroenterol. 巻: - ページ: -
  • DOI: doi: 10.1007/s.12328-015-0574-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Altered intrahepatic microcirculation of idiopathic portal hypertension in relation to glutamine synthetase expression (2015)
  • 著者名/発表者名: Yasunori Sato, Kenichi Harada, Motoko Sasaki, and Yasuni Nakanuma.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: - ページ: -
  • DOI: doi: 10.1111/hepr.12506
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Autoantibody status and histological variables influence biochemical rewsponse to treatment and long-term outcomes in Japanese patients with primary biliary cirrhosis (2015)
  • 著者名/発表者名: Minoru nakamura, Hisayoshi Kondo, Atsushi Tanaka, Atsumasa Komori, Masahiro Ito, Kazuhide Yamamoto, Hiromasa Ohira, Mikio Zeniya, Etsuko Hasimoto, Masao Honda,Shuichi Kaneko, Yoshiyuki Ueno, Kentaro Kikuchi, Shinji Shimoda, Kenichi Harada ,et al.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: 45 ページ: 846-855
  • 査読あり
• [雑誌論文] Natural killer cells regulate T cell immune responses in primary biliary cirrhosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Shimoda S, Hisamoto S, Harada K, Iwasaka S, Chong Y, Nakamura M, Bekki Y, Yoshizumi T, Shirabe K, Ikegami T, Maehara Y, He XS, Gershwin ME, Akashi K.
  • 雑誌名: Hepatology. 巻: Aug11 ページ: 1817-1827
  • DOI: doi: 10.1002/hep.28122.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] 胆道における自然免疫 (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 雑誌名: 病理と臨床 巻: 33(3) ページ: 324-326
  • 査読あり
• [雑誌論文] 胆道疾患の画像診断―基本から最近の進歩まで 臨床病理 (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 雑誌名: 画像診断 巻: 35(6) ページ: 637-648
  • 査読あり
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変の最近の知見 (2016)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第４３回臨床医のための神奈川肝臓病理研究会
  • 発表場所: ローズホテル横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-03-19 – 2016-03-19
  • 招待講演
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変の病態および診断に関する最近の話題 (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第７回福島県自己免疫性肝疾患研究会
  • 発表場所: ホテルサンルートプラザ福島（福島県福島市）
  • 年月日: 2015-11-07 – 2015-11-07
  • 招待講演
• [学会発表] 肝胆道系疾患の病態生理とその治療戦略 (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第１７回金沢医科大学大学院医学研究セミナー
  • 発表場所: 金沢医科大学医学教育棟（石川県河北郡）
  • 年月日: 2015-10-27 – 2015-10-27
  • 招待講演
• [学会発表] Cahges in the histopathologic criteria for diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis: Historical perspective and future directions. (2015)
  • 著者名/発表者名: Y. Ikura, K. Harada, T. Okanoue
  • 学会等名: 第１９回日本肝臓学会大会 ＪＤＤＷ２０１５
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪（東京都港区）
  • 年月日: 2015-10-08 – 2015-10-11
• [学会発表] 原発性胆汁性肝硬変(PBC)における標的細胞と攻撃細胞の階層的関係性 (2015)
  • 著者名/発表者名: 下田 慎治、久本 仁美、原田 憲一
  • 学会等名: 第１１回広島肝臓プロジェクト研究センター シンポジウム
  • 発表場所: ホテルグランヴィア広島（広島県広島市）
  • 年月日: 2015-07-04 – 2015-07-04
• [図書] NASH・NAFLDの診療ガイド2015 (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一 ほか日本肝臓学会NASH診断WG病理医協議会
  • 総ページ数: 54
  • 出版者: 文光堂
• [図書] 胆道疾患を診る医師のための胆道病理テキスト (2015)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一, 佐々木 素子、佐藤 保則、斉川 邦和
  • 総ページ数: 384
  • 出版者: 南江堂