研究課題
HTLV-1ウイルス蛋白であるTAXは、成人T細胞白血病/リンパ腫(ATLL)細胞の増殖に重要な役割を果たし、かつHTLV-1-specific Cytotoxic T lymphocyte(CTL)の標的でもあることが知られている。しかし、HTLV-1-specific CTLがATLL患者のリンパ節の中でどのように作用するかは明らかではない。そこで現在、ATLLの患者のリンパ節検体を用いて、HLA-A24-restricted TAX-specific CTLの蛍光染色を行い、腫瘍のHLA-A24、TAX、Foxp3の発現との関係を検討している。方法:Assay 1:ATLL患者のリンパ節病変にTax-specific CTLはいるのか?PCR法にて、HLA-A24を確認したATLLのFrozen sectionを用いて、MHC dextramerによりHLA-A24 restricted TAX-specific CTLを蛍光染色を行っている。Tax-specific CTLとFOXp3の関係を解析するため、抗FOXp3抗体(Abcam)を使用し免疫染色を行っている。また、Tax-specific CTLの活性をみるため、INFγの免疫染色を行っている。その結果、部の症例で、ATLLのリンパ節病変内にはTax-specific CTLが認められている。また、Tax-specific CTL数は、形態との関連はみられなかったが、FOXp3陽性の症例では優位に低い傾向がみられたが、現在、症例の追加を行い解析を継続中である。
2: おおむね順調に進展している
HTLV-1関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的CTLの病態解析:今回の研究にあたり以下の方法:方法1,2,3は、確立できたため、今後は症例の選定、追加を行う予定をしている。方法1) ATLL患者のリンパ節病変にTax-specific CTLはいるのかを確認するため、PCR法にて、HLA-A24を確認したATLLのFrozen sectionを用いて、MHC dextramerによりHLA-A24 restricted TAX-specific CTLを蛍光染色を行っている。方法2) Tax-specific CTLとFOXp3の関係を解析するため、抗FOXp3抗体(Abcam)を使用し免疫染色を行っている。方法3) Tax-specific CTLの活性をみるため、INFγの免疫染色を行っている。
HTLV-1関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的CTLの病態解析については上記のように、今後は症例の選定、追加を行う予定をしている。EBV関連リンパ腫におけるウイルス抗原特異的CTLの病態解析においては、まだ、開始を行っていないが、びまん大細胞型リンパ腫において、免疫逃避タンパクPDL-1および、その作用タンパクであるPD1の解析とEBVの感染の関連を解析予定にしており、現在、症例の選定を行っている。また、PDL-1, PD1の免疫染色については、方法は、現在確定している。
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