| 研究課題/領域番号 |
26460474
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| 研究機関 | 札幌医科大学 |
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研究代表者 |
市戸 義久 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (80452978)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 肝幹・前駆細胞 / 骨髄間葉系細胞 / 細胞移植 / IL17B/IL25 / 再生医学 |
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| 研究実績の概要 |
肝幹・前駆細胞であるThy1陽性オーバル細胞をRetrorsine/Partial Hepatectomy (Ret/PH)モデル肝臓に移植すると、肝臓に生着し移植巣を形成する細胞数は少ないが、レシピエント由来の類洞内皮細胞(SECs)でIL17Bを，Kupffer細胞でIL25の発現を誘導することで、肝前駆細胞(Small hepatocytes-like progenitor cells; SHPCs)の増殖を促進することをこれまでに報告した。しかしながら、①実際にIl17BやIL25が肝前駆細胞を増殖促進させるか、②SECsやKupffer細胞にIL17BやIl25を誘導させるメカニズム、③Thy1を高発現する骨髄間葉系細胞(MSCs)移植でも同じようにSHPCsを増大させるか、が未解明であった。そこで、①に関して、Ret/PH1日後肝臓から単離した成熟肝細胞を培養し、ヒト由来IL17B及びIL25を培地に添加した。１週間後に出現した小型肝細胞コロニー数は、コントロール(無添加群)33.3±10.2個, IL17B投与群で48.3±16.9個, IL25投与群で49±17.4個であった。コロニー形成細胞数は、コントロール83.1±5.3個、IL17B投与群で113.0±7.6個、IL25投与群で135.1± 9.3個であった。IL17B, IL25投与はコロニー形成を促進した。②に関して、Thy1陽性細胞由来Microvesicles(MVs)をSECs、Kupffer細胞へ24時間投与したところ、SECsでIL17Bの、Kupffer細胞でIL25の発現が上昇した。③に関して、MSCsをRet/PH モデルに移植するとSHPCsの増生が促進された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
今のところ、研究実施計画に沿って進んでいる。今後はThy1陽性細胞とMSCs由来MVsからmiRNAやタンパク質の網羅的解析を行い、共通因子を抽出し、IL17B/IL25の誘導因子や増殖促進因子を同定していく。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は、IL17B/IL25による増殖シグナルの解析、及びThy1陽性細胞とMSCs由来MVsの中からIL17B/IL25誘導因子および増殖促進因子を同定し、in vitroで機能評価してからin vivoへ展開していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究には候補となる液性因子の網羅的解析が必要であり、解析を行う上での最適条件の検討を現在行っている。解析に必要な額を留保したため、次年度使用額が生じている。
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| 次年度使用額の使用計画 |
受諾解析費用、サンプル作製の研究補助者に対する謝金、及び実験動物や実験器具などの消耗品の購入に用いる。
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