新しいNASHモデルマウスの病態発症機序の解析

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26460485
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 蕨 栄治 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70396612)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: NASH

研究実績の概要

非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)は、飲酒歴がないにもかかわらず中性脂肪を主とする脂肪の蓄積が肝細胞に起こり、炎症・線維化をきたす致死的疾患である。本邦では 200 万人以上の罹 患者がいると推定され今後も増大することが予想されており、対策が社会的急務となっている。 申請者らは、p62 ならびに Nrf2 遺伝子を二重欠損したマウスを作製し、これがヒト NASH 病態 と非常に類似した表現型を示す、これまでに無い優れたモデル動物であることを見出し、その発症機序について解析してきた。今年度は、肝Kupffer細胞と腸に主眼をおき、本マウスのNASH発症機序をin vivo、in vitroの両面から検討した。野生型、p62-KO、Nrf2-KO、DKOマウスCRISPR-Cas9システムを用い、各遺伝子を欠損したRaw264。7（マウスマクロファージ由来細胞）、Caco-2（ヒト腸管上皮由来細胞）を作成した。Raw264。7ではLPSによる炎症反応を、Caco-2ではバリア機能を評価して、NASH発症機序における各遺伝子の機能を検討した。Raw264。7細胞のLPSによる炎症反応は、p62欠損により増悪した。Nrf2欠損ではさらに著しい増悪がみられた。また、Caco-2細胞のタイトジャンクションタンパク質の発現は、Nrf2欠損により低下した。DKOマウスでは若齢時より、Nrf2欠損による腸管のバリア機能低下、および肝Kupffer細胞のLPSに対する過剰な炎症反応が生じており、さらに、p62欠損による過食肥満、腸内細菌叢の変容、LPS産生の増大が同時に進行することでNASHへと進展していくものと推察された。

研究成果

• [雑誌論文] Autophagy controls centrosome number by degrading Cep63. (2016)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Honda S, Konishi A, Arakawa S, Murohashi M, Yamaguchi H, Torii S, Tanabe M, Tanaka S, Warabi E, Shimizu S.
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 7 ページ: 13508.
  • DOI: 10.1038/ncomms13508.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Detailed Analysis of the Binding Mode of Vanilloids to Transient Receptor Potential Vanilloid Type I (TRPV1) by a Mutational and Computational Study. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohbuchi K, Mori Y, Ogawa K, Warabi E, Yamamoto M, Hirokawa T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 ページ: e0162543.
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0162543.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Ignavine: a novel allosteric modulator of the μ opioid receptor. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohbuchi K, Miyagi C, Suzuki Y, Mizuhara Y, Mizuno K, Omiya Y, Yamamoto M, Warabi E, Sudo Y, Yokoyama A, Miyano K, Hirokawa T, Uezono Y.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 6 ページ: 31748.
  • DOI: 10.1038/srep31748.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Functional links between SQSTM1 and ALS2 in the pathogenesis of ALS: cumulative impact on the protection against mutant SOD1-mediated motor dysfunction in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hadano S, Mitsui S, Pan L, Otomo A, Kubo M, Sato K, Ono S, Onodera W, Abe K, Chen X, Koike M, Uchiyama Y, Aoki M, Warabi E, Yamamoto M, Ishii T, Yanagawa T, Shang HF, Yoshii F.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet. 巻: 25 ページ: 3321-3340.
  • DOI: 10.1093/hmg/ddw180.
  • 査読あり
• [雑誌論文] p62 modulates the intrinsic signaling of UVB-induced apoptosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ito S, Kimura S, Warabi E, Kawachi Y, Yamatoji M, Uchida F, Ishibashi-Kanno N, Yamagata K, Hasegawa S, Shoda J, Tabuchi K, Sakai S, Bukawa H, Sekido M, Yanagawa T.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 83 ページ: 226-233.
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2016.05.005.
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of peroxiredoxin I in cisplatin-induced ototoxicity. (2016)
  • 著者名/発表者名: Le Q, Tabuchi K, Warabi E, Hara A.
  • 雑誌名: Auris Nasus Larynx 巻: 44 ページ: 205-212.
  • DOI: 10.1016/j.anl.2016.06.001.
  • 査読あり
• [学会発表] p62:Nrf2遺伝子二重欠損マウスの肝蔵、内臓脂肪、腸内環境の解析よりみた NASH発症機序の解明 (2016)
  • 著者名/発表者名: 秋山健太郎、蕨栄治、正田純一
  • 学会等名: 第41回日本肝臓学会東部会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京・新宿区）
  • 年月日: 2016-12-08
• [学会発表] 継続的な運動はKupffer細胞の異物貪食能の増大により、菌体内毒素(LPS)のクリアランスを増大させ、LPS刺激による炎症応答を低下させる (2016)
  • 著者名/発表者名: 小峰昇一、秋山健太郎、蕨栄治、正田純一
  • 学会等名: 第41回日本肝臓学会東部会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京・新宿区）
  • 年月日: 2016-12-08
• [学会発表] 継続的な運動負荷は菌体内毒素（LPS）クリアランスを増大させ、LPS刺激による炎症応答を低下させる (2016)
  • 著者名/発表者名: 小峰昇一、秋山健太郎、蕨栄治、正田純一
  • 学会等名: 第71回日本体力医学会大会
  • 発表場所: いわて県民情報交流センター（岩手・盛岡市）
  • 年月日: 2016-09-24
• [学会発表] 非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)自然発症マウスにおける Kupffer 細胞の表現形質の変化と発症機序との関連性 (2016)
  • 著者名/発表者名: 秋山健太郎、蕨栄治、正田純一
  • 学会等名: 102回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京・新宿区）
  • 年月日: 2016-04-21