| 研究課題/領域番号 |
26460703
|
|---|
| 研究機関 | 国際医療福祉大学 |
|---|
研究代表者 |
天野 託 国際医療福祉大学, 薬学部, 教授 (10294547)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | ナトリウムチャネル / 痛み / 漢方 / 電気生理学 / パッチクランプ |
|---|
| 研究実績の概要 |
Naｖ1.7安定化発現HEK293（ヒト胎児腎細胞）細胞株を用い、附子末と附子末を含有しない六味丸のNaｖ1.7に対する作用をパッチクランプ法を用いて電気生理学的に検討した。
温熱抽出された附子末の投与により、Naｖ1.7チャネルのピーク電流は、（0.003mg/mL、0.006mg/mL、0.015mg/mL、0.03mg/mL、0.3mg/mL、3mg/mL）用量依存的な抑制が認められた。用量反応曲線からEC50は0.01751 mg/mLであった。附子末の不活性化曲線には、0.3mg/mL附子末存在下では、不活性化曲線の過分極側へのシフトが見られた。さらに、六味丸の投与により、Naｖ1.7チャネルのピーク電流は、（0.0125mg/mL、0.025mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL）用量依存的な抑制が認められた。。用量反応曲線からEC50は0.22689 mg/mLであった。六味丸の不活性化曲線は、controlに比べ、0.5mg/mL六味丸存在下では、附子末と異なり不活性化曲線の過分極側へのシフトは認められなかった。
以上のことより、附子末および六味丸の投与により、Naｖ1.7チャネルのピーク電流の濃度依存的な抑制が認められた。また、附子末を含まない六味丸にもNaｖ1.7チャネルの抑制に関与している生薬が存在すると考えられた。さらに、附子末存在下では、不活性化曲線の過分極側へのシフトが見られ、六味丸存在下では、不活性化曲線の過分極側へのシフトは認められなかったことから、附子末に不活性化曲線の過分極側へのシフトさせる成分が含まれていると考えられた。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
Nav1.7とTRPチャネル共発現する。細胞の作成に手間取っているが、概ね研究は順調に推移している。
|
| 今後の研究の推進方策 |
六味丸を構成する生薬の中から、ナトリウムチャネル電流の抑制に関与する生薬成分を電気生理学的に探索していく。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
Nav1.7とTRPチャネル共発現細胞の作成の進行が遅れているために、使用する金額が抑えられている。
|
| 次年度使用額の使用計画 |
今後、細胞の作成のにDNAの購入などで使用金額が増える予定である。
|
