| 研究課題/領域番号 |
26460811
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
李 卿 日本医科大学, 医学部, 准教授 (50250048)
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| 研究分担者 |
川田 智之 日本医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00224791)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | カーバメイト系農薬 / Thiram / Maneb / Carbaryl / Ziram / NK細胞 / Perforin / Granzyme |
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| 研究実績の概要 |
【目的】平成27年度ではカーバメイト系農薬Thiram, Maneb及びCarbarylによるヒトNK細胞内Perforin、Granzymes A-B-3/K及びGranulysinへの影響について検討した。
【材料と方法】本研究ではNK細胞としてNK-92CI細胞を用いた。Thiram、Ziram、Maneb及びCarbarylを用いてin vitroでNK-92CI細胞を4～24時間処理した後、以下の方法でNK細胞内のperforin、granzymes A-B-3/K,及びgranulysinへの影響を検討した。Ziramは対照として用いた。①Perforin及びGranzymes A-B-3/Kの測定はマウス抗ヒトPerforin及びGranzymes A-B-3/K抗体を用いて免疫染色した後Flow cytometry法で行われた。②Granulysinの測定はウサギ抗ヒトGranulysin抗体を用いて免疫染色した後Flow cytometry法で行われた。
【結果と考察】①Thiram、 Maneb及びCarbarylはZiramと同様に用量・処理時間に依存してNK-92CI細胞内Perforin、Granzymes A-B-3/K,及びGranulysinのレベルを低下させることが明らかとなった。各農薬の強さの順位はThiram＞Ziram＞Maneb＞Carbarylである。②農薬に対して各抗癌タンパク質の反応性が異なり、Perforinは最も抑制されやすく、その抑制順位はperforin > GRN > Gr3/K ≒GrA ≒ GrBである。③化学物質の免疫毒性評価においてNK細胞内Perforin、Granzymes A-B-3/K,及びGranulysin の測定はNK活性測定の代替法として有望であることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成27年度では当初の計画通り、カーバメイト系農薬Thiram, Maneb及びCarbarylによるヒトNK細胞内Perforin、Granzymes A-B-3/K及びGranulysinへの影響について検討し、仮説通り、カーバメイト系農薬が有意にヒトNK細胞内Perforin、Granzymes A-B-3/K及びGranulysinの量を減少させることが明らかになった。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成28年度ではカーバメイト系農薬によるヒトNK活性への影響及びその機序を検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
論文の誌上発表は次年度となったため、当初本年度に予算していた論文掲載料及び別刷料は次年度で使用することになった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度使用額は論文掲載料及び別刷料に充てる。
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| 備考 |
http://tlo.nms.ac.jp/researcher/872.html
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