抗インフルエンザ薬に対する耐性ウイルスの検出に関する研究

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26460816
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 高下 恵美 国立感染症研究所, インフルエンザウイルス研究センター, 主任研究官 (30361249)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 抗インフルエンザ薬 / 薬剤耐性ウイルス

研究実績の概要

インフルエンザの治療・予防には主に、インフルエンザウイルスのノイラミニダーゼ（NA）蛋白質を標的とするNA阻害剤が使用されている。日本は世界最大級のNA阻害剤使用国であり、薬剤耐性ウイルスの出現リスクが高い。したがって耐性ウイルスの発生動向の把握は公衆衛生上極めて重要であり、継続的な薬剤耐性ウイルスサーベイランスが必須である。
現行のNA阻害剤耐性ウイルスの検出系にはMUNANA基質を用いる蛍光法、NA-StarあるいはNA-XTD基質を用いる化学発光法があるが、いずれもウイルス分離株を用いるため、培養細胞を用いて臨床検体からウイルスを分離する必要がある。したがって、臨床検体中に含まれるウイルス量が少なくウイルス分離が困難な場合には、耐性ウイルスを見逃す危険性があった。そこで本研究では、高感度のQFlu基質を用いる化学発光法によりウイルス分離を行わずに臨床検体中の耐性ウイルスを直接検出する系を確立した。
中国でヒトへの感染が続いている鳥インフルエンザA(H7N9)ウイルスあるいは高病原性鳥インフルエンザA(H5N1)ウイルス等について、抗インフルエンザ薬耐性ウイルスの検出をより安全に実施するために、Triton X-100またはβ-プロピオラクトンによりウイルスを不活化し、不活化ウイルスを用いる検出系を確立した。MUNANA基質を用いる蛍光法、NA-StarあるいはNA-XTD基質を用いる化学発光法のいずれにも対応可能である。

研究成果

• [雑誌論文] Global update on the susceptibility of human influenza viruses to neuraminidase inhibitors, 2014-2015. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hurt AC, Besselaar TG, Daniels RS, Ermetal B, Fry A, Gubareva L, Huang W, Lackenby A, Lee RT, Lo J, Maurer-Stroh S, Nguyen HT, Pereyaslov D, Rebelo-de-Andrade H, Siqueira MM, Takashita E, Tashiro M, Tilmanis D, Wang D, Zhang W, Meijer A.
  • 雑誌名: Antiviral Res. 巻: 132 ページ: 178-185
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2016.06.001.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Antiviral susceptibility of influenza viruses isolated from patients pre- and post-administration of favipiravir. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Ejima M, Ogawa R, Fujisaki S, Neumann G, Furuta Y, Kawaoka Y, Tashiro M, Odagiri T.
  • 雑誌名: Antiviral Res. 巻: 132 ページ: 170-177
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2016.06.007.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Influenza A(H1N1)pdm09 virus exhibiting enhanced cross-resistance to oseltamivir and peramivir due to a dual H275Y/G147R substitution, Japan, March 2016. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Fujisaki S, Shirakura M, Nakamura K, Kishida N, Kuwahara T, Shimazu Y, Shimomura T, Watanabe S, Odagiri T; Influenza Virus Surveillance Group of Japan.
  • 雑誌名: Euro Surveill. 巻: 21 ページ: 30258
  • DOI: 10.2807/1560-7917.ES.2016.21.24.30258.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] TMPRSS2 Independency for Haemagglutinin Cleavage In Vivo Differentiates Influenza B Virus from Influenza A Virus. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sakai K, Ami Y, Nakajima N, Nakajima K, Kitazawa M, Anraku M, Takayama I, Sangsriratanakul N, Komura M, Sato Y, Asanuma H, Takashita E, Komase K, Takehara K, Tashiro M, Hasegawa H, Odagiri T, Takeda M.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 6 ページ: 29430
  • DOI: 10.1038/srep29430.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 日本国内で検出されたA(H1N1)pdm09二重耐性変異ウイルスの性状解析. (2017)
  • 著者名/発表者名: 高下恵美.
  • 学会等名: 6th Negative Strand Virus-Japan
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2017-01-16 – 2017-01-18
• [学会発表] 2015/16シーズンに検出されたオセルタミビル・ペラミビルに強い耐性を示すインフルエンザウイルス. (2016)
  • 著者名/発表者名: 高下恵美, 小川理恵, 藤崎誠一郎, 白倉雅之, 三浦秀佳, 中村一哉, 岸田典子, 桑原朋子, 菅原裕美, 佐藤彩, 秋元未来, 渡邉真治, 小田切孝人.
  • 学会等名: 第48回日本小児感染症学会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2016-11-19 – 2016-11-20
• [学会発表] Detection of influenza A(H1N1)pdm09 viruses exhibiting enhanced cross-resistance to oseltamivir and peramivir in the 2015/16 season. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Fujisaki S, Shirakura M, Nakamura K, Kishida N, Kuwahara T, Shimazu Y, Shimomura T, Doi I, Watanabe S, Odagiri T, The Influenza Virus Surveillance Group of Japan.
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2016-10-23 – 2016-10-25
• [学会発表] Antiviral susceptibility of influenza viruses isolated from patients pre-and post-administration of favipiravir. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takashita E, Ejima M, Ogawa R, Fujisaki S, Neumann G, Furuta Y, Kawaoka Y, Tashiro M, Odagiri T.
  • 学会等名: Options IX for the Control of Influenza
  • 発表場所: Chicago, USA.
  • 年月日: 2016-08-24 – 2016-08-28
  • 国際学会
• [図書] インフルエンザ診療ガイド2016-17 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高下恵美.
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: 日本医事新報社
• [備考] 抗インフルエンザ薬耐性株サーベイランス
  • URL: http://www.nih.go.jp/niid/ja/influ-resist.html