| 研究課題/領域番号 |
26460932
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
岩切 大 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教 (10307853)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | EBV / EBER / 胃がん / エクソソーム |
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| 研究実績の概要 |
本研究ではまず、EBウイルス(EBV)感染胃がん細胞により放出されるエクソソームの発がんにおける役割について、特にその中に含まれるEBVのnon-coding RNAであるEBERの活性に関しての検証をおこなっている。樹立した種々のEBV感染胃がん細胞の培養上清からエクソソームを抽出、そこからRNAをさらに抽出してEBERの検出を試み、用いた全てのEBV感染胃がん細胞由来のエクソソームでEBERの存在を確認した。さらにエクソソーム分泌の阻害剤により、培養上清中のEBERの量が減少したことから、EBERがエクソソーム依存的に放出されていることがわかった。続いてエクソソームを加えたレシピエント細胞内においてEBERの存在が確認され、エクソソームを介した細胞内へのEBERが取り込まれていることがわかった。さらに、EBER欠損ウイルス感染細胞、および野性型ウイルス感染細胞由来のエクソソームの活性についての比較検討から、このEBERを含んだ野性型ウイルス感染細胞由来のエクソソームは、それを取り込んだレシピエント細胞からのⅠ型インターフェロン(IFN)産生を誘導することを明らかにし、それはEBERによるTLR3シグナルの活性化をかいしているものと推測された。一方、EBV感染細胞と非感染細胞を用いてその培養上清のエクソソームに含まれるmiRNAについて網羅的な解析をおこない、EBV感染細胞に特異的と思われるmiRNAの存在を確認し、その機能の意義についても検証中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
種々のEBV感染胃がん細胞においてEBERがエクソソーム依存的に放出されていること、さらにそのエクソソームの活性により、レシピエント細胞のIFN産生が誘導されることが明らかになった。この結果は、これまで申請者が明らかにした、IFNシグナルを介したEBV感染胃がん細胞の増殖促進に寄与していると予想され、本研究の目的である、EBVによる胃がんの発生機構の解明につながるものと考えられた。そのため研究は概ね計画通りに進んでいると思われる。
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| 今後の研究の推進方策 |
EBERを含んだエクソソームの活性について、EBV感染胃がん細胞におけるTLR3シグナルやIFNシグナルとの関連を中心に解析をさらに進め、EBV感染胃がん細胞の増殖における役割などその意義を明らかにする。またエクソソーム内のmiRNAの機能について詳細に検討し、それらがEBVによる発がんとどのように関わっているかについて明らかにしていく。さらに、EBER発現の有無がエクソソームmiRNAの存在にどう影響するか等について、EBER欠損ウイルス感染細胞を用いた検証もおこなう予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
受託解析のための検体作成時には年度内に間に合う予定であったが、委託業者の検査試薬の在庫の関係で納期が年度末にかかってしまい、結果としてその費用の計上が出来なかったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
H26年度末に納品はされており、すでに次年度分より経費は差し引かれている。そのため、次年度は当初の計画通りに実施、費用を使用していく予定である。
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