2014 年度実施状況報告書

プロテオミクス解析およびパスウェイ解析による新規胃癌バイオマーカーの検討

研究課題

研究課題/領域番号	26460949
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	高石官均慶應義塾大学, 医学部, 准教授 (80286468)
研究分担者	船越信介慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20297352) 足立雅之慶應義塾大学, 医学部, 助教 (70338028)
研究期間 (年度)	2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード	胃癌バイオマーカー
研究実績の概要	本研究では胃癌の網羅的発現解析を行い、腫瘍の生物学的特徴を解明するとともに薬効予測に有用な新規バイオマーカーを探索することを目的とする。まず培養細胞株を用い、胃癌バイオマーカーの探索を行った。SNU-16, AGS, SNU-5, SNU-1, NCI-N87, KATO-III, Hs746Tの7種について遺伝子プロファイルの検索を行い、NCI N87(HER2陽性),Hs746T(MET陽性), KATO-III(FGFR2陽性)を抽出した。癌細胞に発現するCD44v8-10はcystine transporter(xCT)の安定化に寄与することで酸化ストレスに抵抗性の性質を獲得していることが明らかにされている。今回抽出された3種の細胞についてCD44v8-10の発現確認と、xCT阻害剤としてのsulfasarazine(SSZ)に対する感受性の比較を行った。 ①WBにてCD44v8-10の発現比較を行った。発現はHs746Tで高く、NCI N87ではやや低め、KATO-IIIではほぼ発現を認めなかった。 ②これらの細胞に対し、SSZに対する感受性の評価を行った。In vitroの評価として各々の細胞に対しSSZ treat後viabilityの比較を行った。一方、in vivoの評価として各々の細胞を移植した担癌マウスに対しSSZの腹腔投与を行い、その腫瘍径について観察・比較を行った。その結果in vitroではCD44v高発現株である746T細胞で高い感受性を示したが、in vivoでは感受性をほぼ認めなかった。NCI N87細胞ではin vitroにおいてはほとんど感受性を示さなかったものの、in vivoにおいては高い感受性を示していた。これらの予想された結果との相違点とHER2およびMET発現の相互関係について明らかにできれば新たな治療戦略の鍵となると思われる。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 3: やや遅れている理由当院において経験した胃癌手術症例を用いて、liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LS-MS/MS)　、ショットガン解析、免疫染色、selective reaction monitoring定量アッセイなどの手法を用いて解析を行う予定であるが、手術検体の入手件数が限られており、サンプル数の確保が容易でない状況にあるため。
今後の研究の推進方策	胃癌細胞株を用いた網羅的発現解析を行い、腫瘍の生物学的特徴を解明するとともに薬効予測に有用な新規バイオマーカーの探索および、3D培養システムおよび動物モデルを用いた新規治療薬の開発の方へ着手する。さらに今年度より研究分担者として須河医師を迎え実験を行っていく予定である。