脂肪組織由来間質細胞群の細胞分画特性解析と肝修復再生療法の開発

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26460995
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 酒井 佳夫 金沢大学, 医学系, 准教授 (80401925)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 脂肪組織由来間質細胞 / 肝再生療法

研究実績の概要

本研究は、脂肪組織由来間質細胞群の細胞分画を分類し、各細胞分画の生物学的特性を解析し、肝疾患に対する修復再生療法に重要な分画を解明することを目的としている。C57BL/6Jマウスの鼠径部皮下脂肪組織を採取、酵素処理を行い間質細胞を分離した。表面抗原解析では、CD45陽性細胞が10～20%含有されていた。脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞のうち、約50%がCD68を発現し、マクロファージ様発現型を示した。さらに、その90%がCD206を発現するM2フェノタイプマクロファージが示唆された。脾細胞および末梢血液細胞のCD45+細胞と比較して、脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞では、Il1b、Tnf、Il23a、Cd80、Il6, Nos2, Il12a, Il12bのM1マクロファージ関連遺伝子の発現が低下し、CD206、CCl22、Ccl24のM2マクロファージ発現が上昇を示した。脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞とCD45-細胞の遺伝子発現プロファイルをDNAマイクロアレイにて比較検討したところ、CD45+陽性細胞で2884遺伝子が発現上昇、3838遺伝子が発現減弱を示した。発現上昇した遺伝子は、免疫制御に、発現減弱した遺伝子は発生形成に関連を示した。また、脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞をConA刺激下脾細胞と２時間共培養した後の、脾細胞の遺伝子発現をリアルタイム定量PCRで評価した結果、Ccl3、Tnf、Ifngの発現が低下した。ConA急性肝炎マウスに脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞を投与したところ、血清ALTの低下を認めた。以上より、脂肪組織由来間質細胞群のCD45+細胞は、抑制性マクロファージ類似の表現型、機能を有し、肝臓の炎症に対して抑制的に作用することが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Phase I clinical study of liver regenerative therapy for cirrhosis by intrahepatic arterial infusion of freshly isolated autologous adipose tissue-derived stromal/stem (regenerative) cell. (2017)
  • 著者名/発表者名: Sakai Y, Takamura M, Seki A, Sunagozaka H, Terashima T, Komura T, Yamato M, Miyazawa M, Kawaguchi K, Nasti A, Mochida H, Usui S, Otani N, Ochiya T, Wada T, Honda M, Kaneko S.
  • 雑誌名: Regenerative Therapy 巻: 6C ページ: 52-64
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Branched-chain amino acids prevent hepatic fibrosis and development of hepatocellular carcinoma in a non-alcoholic steatohepatitis mouse model. (2017)
  • 著者名/発表者名: Takegoshi K, Honda M, Okada H, Takabatake R, Matsuzawa-Nagata N, Campbell JS, Nishikawa M, Shimakami T, Shirasaki T, Sakai Y, Yamashita T, Takamura T, Tanaka T, Kaneko S.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 8 ページ: 18191-18205
  • DOI: 10.18632/oncotarget.15304.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adipose-derived regenerative cells exert beneficial effects on systemic responses following myocardial ischemia/reperfusion. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takamura M, Usui S, Inoue O, Ootsuji H, Takashima SI, Nomura A, Kato T, Murai H, Furusho H, Sakai Y, Kaneko S.
  • 雑誌名: Cardiol J 巻: 23 ページ: 685-693
  • DOI: doi: 10.5603/CJ.a2016.0061.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Response to chemotherapy improves hepatic reserve for patients with hepatocellular carcinoma and Child-Pugh B cirrhosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Terashima T, Yamashita T, Arai K, Kawaguchi K, Kitamura K, Yamashita T, Sakai Y, Mizukoshi E, Honda M, Kaneko S.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 107 ページ: 1263-1269
  • DOI: 10.1111/cas.12992.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Jagged1 DNA Copy Number Variation Is Associated with Poor Outcome in Liver Cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi K, Honda M, Yamashita T, Okada H, Shirasaki T, Nishikawa M, Nio K, Arai K, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Kaneko S
  • 雑誌名: Am J Pathol. 巻: 186 ページ: 2055-2067
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2016.04.011.
  • 査読あり
• [学会発表] 体性幹細胞を含む自己脂肪組織由来間質細胞による肝硬変再生療法実用化開発 ～ 非臨床・臨床研究から治験準備にむけて (2017)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫
  • 学会等名: 第2回再生医療セミナー
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2017-03-26 – 2017-03-26
  • 招待講演
• [学会発表] 医師主導治験を目指した自己脂肪組織由来再生（幹）細胞による肝硬変再生療法実用化研究 (2017)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫
  • 学会等名: 再生医療サミット IN OKINAWA 2017
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2017-03-02 – 2017-03-02
  • 招待講演
• [学会発表] linical study of liver regenerative therapy of cirrhosis using autologous adipose tissue derived stromal cells and the characterization of the obtained stromal cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Y. Sakai, A. Seki, H. Sunagozaka, T. Terashima, K. Kawaguchi, G.B. Buffa, M. Honda, S. Kaneko
  • 学会等名: AASLD, The Liver Meeting 2016
  • 発表場所: Boston
  • 年月日: 2016-11-12 – 2016-11-12
  • 国際学会
• [学会発表] 肝硬変に対する自己脂肪組織由来再生（幹）細胞を用いた安全性臨床試験 (2016)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関 晃裕、金子周一
  • 学会等名: JDDW 2016
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2016-11-04 – 2016-11-04
• [学会発表] 自己脂肪組織由来間質細胞の経肝動脈投与による肝硬変療法臨床開発 (2016)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関 晃裕、金子周一
  • 学会等名: 第102回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2016-04-22 – 2016-04-22
• [図書] 再生医療等製品の開発と実用化展望 (2016)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、金子周一
  • 総ページ数: 10
  • 出版者: シーエムシー出版刊