NASH発症における自然免疫防御反応とKupffer細胞の機能分化の解析

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26461010
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 小野 正文 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 准教授 (70304681)
• 研究分担者: 中島 弘幸 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究, その他部局等, 助教 (10574064) ; 西原 利治 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 教授 (60145125)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 肝臓学 / NASH / Kupffer細胞 / CD68+Kupffer細胞 / CD１１b＋Kupffer細胞 / 腸内細菌

研究実績の概要

これまで我々はNASH（非アルコール性脂肪肝炎）発症病態においてKupffer細胞の機能異常が重要な役割を果たしている事を明らかにしてきたが、さらに「肝臓の自然免疫防御としてのKupffer細胞のサブセットの変化による異常状態と細胞老化」に焦点を当て、NASHの病因解明にアプローチすることを本研究の目的して研究を進めてきた。
NASHモデル動物においては、Kupffer細胞サブセットであるCD11b+Kupffer細胞が増加しCD68+Kupffer細胞が減少するが、サイトカイン分泌を主に担うCD11b+Kupffer細胞が増加し、貪食能を主に担うCD68+Kupffer細胞が減少することが明らかとなった。NASH肝においてはKupffer細胞が増加するが、そのサブセットの変化がサイトカインの過剰分泌とともに貪食能の低下という自然免疫の異状状態を来たしていることが明らかとなった。また、CD68+Kupffer細胞は肝臓レジデントな細胞であると推定されるのに対し、CD11b+Kupffer細胞は主に脾臓や骨髄などの肝臓外から流入する細胞が中心であることが明らかとなった。さらに、肝切除など急激な肝再生の際にはCD11b+Kupffer細胞は骨髄からの供給が主体となっていることも明らかとなった。（PLoS One. 2015 ;10(9):e0136774.）。また、未発表データーながら、NASH肝においても急激な肝障害の際にはCD11b+Kupffer細胞の主な供給は脾臓から骨髄にシフトすることが確かめられた（未発表データ）。
以上のように、研究助成により順調に研究成果が上がっているものと考えられる。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

昨年から本年度にかけて順調に数多くの研究データーが出ており、その実験結果に関する論文発表と学会での報告が行われている。

今後の研究の推進方策

今後は、NASH発症における肝星細胞およびKupffer細胞の細胞老化の果たす役割について検討を進めていく予定としている。NASHでは肝細胞やKupffer細胞などがアポトーシスを起こしているが、死滅せずに生き残った老化細胞も多く存在していると推定されている。我々の検討でもNASHのKupffer細胞からはIL-6やIL-1、CXCL9などが過剰に分泌されることから、細胞老化を来した肝星細胞およびKupffer細胞が多く認められると考えられる（未発表データ）。マクロファージも疾患に応じて細胞老化を来す状態があることが最近報告されており、同様のことがNASHのKupffer細胞においても認められることが想定される。一般に、CD11b+Kupffer細胞が主に炎症性サイトカインを分泌するとされているが、細胞老化を来すことで炎症性サイトカインを過剰に分泌するKupffer細胞の由来がCD11b+Kupffer細胞なのかCD68+Kupffer細胞なのかなどは明らかになっていない。さらに、NASHのKupffer細胞のうち、アポトーシスおよび細胞老化を来す細胞の割合を評価し、炎症性サイトカインの過剰分泌との関連を明らかにする。以上、細胞老化の評価はこれまでの報告の通り、IL-6やIL-1、CXCL9などSASP因子の発現とp21やp16蛋白の発現により評価を行うこととする。さらにNASHにおいてなぜ死滅せずに生き残った老化細胞が多く存在するのか、また、細胞老化を来す原因について、他の慢性肝疾患モデル動物と比較検討し、NASH特有の現象なのかどうかについても検討を行うこととする。さらに、老化細胞の持続的な存在を防ぐ手段についてもNASHマウスモデルを用いた実験から検討を行うこととする。また、NASH患者から採取した肝組織においてもIL-6やIL-1、CXCL9などSASP因子の発現とp21やp16蛋白の発現について評価を行い、臨床データと比較検討してその原因について明らかにする方向で準備を進めて行く予定である。

次年度使用額が生じた理由

購入予定であった消耗品を購入しなかったため

次年度使用額の使用計画

28年度に購入・使用予定である。

研究成果

• [雑誌論文] 非アルコール性脂肪肝炎を来す薬剤 (2016)
  • 著者名/発表者名: 宮村充彦，横田淳子，西原利治
  • 雑誌名: 薬学雑誌 巻: 136 ページ: 579-582
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] PNPLA3 is involved in hepatic fatty acid and triglyceride metabolism through XBP1 and modulation of endoplasmic reticulum stress in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ochi T, Munekage K, Ono M, Higuchi T, Tsuda M, Hayashi Y, Okamoto N, Toda K, Sakamoto S, Oben JA, Saibara T
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1111/hepr.12587
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Hepatocellular carcinoma in Japanese patients with nonalcoholic fatty liver disease and alcoholic liver disease: multicenter survey. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tokushige K, Hyogo H, Nakajima T, Ono M, Kawaguchi T, Honda K, Eguchi Y, Nozaki Y, Kawanaka M, Tanaka S, Imajo K, Sumida Y, Kamada Y, Fujii H, Suzuki Y, Kogiso T, Karino Y, Munekage K, Kuromatsu R, Oeda S, Yanase M, Mori K, Ogawa Y, Seko Y, Takehara T, Itoh Y, Nakajima A, Kanemasa K, Saibara T
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1129-1
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Magnetic Resonance Imaging More Accurately Classifies Steatosis and Fibrosis in Nonalcoholic Fatty Liver Disease Than Transient Elastography. (2016)
  • 著者名/発表者名: Imajo K, Kessoku T, Honda Y, Tomeno W, Ogawa Y, Mawatari H, Fujita K, Yoneda M, Taguri M, Hyogo H, Sumida Y, Ono M, Eguchi Y, Inoue T,Yamanaka T, Wada K, Saito S, Nakajima A
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 150 ページ: 626-37
  • DOI: doi:10.1053/j.gastro.2015.11.048
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Are genetic variations the most important risk factors for development of hepatocellular carcinoma? (2016)
  • 著者名/発表者名: Ono M，Saibara T
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 51 ページ: 404-5
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1130-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 脂肪肝を防ぐ食生活と治療を考える (2016)
  • 著者名/発表者名: 西原利治
  • 雑誌名: 日本内科学会雑誌 巻: 105 ページ: 406-10
• [雑誌論文] A novel noninvasive diagnostic method for nonalcoholic steatohepatitis using two glycobiomarkers． (2015)
  • 著者名/発表者名: Kamada Y，Ono M，Hyogo H，Fujii H，Sumida Y，Mori K，Tanaka S，Yamada M，Akita M，Mizutani K，Fujii H，Yamamoto A，Takamatsu S，Yoshida Y，Itoh Y，Kawada N，Chayama K， Saibara T，Takehira T，Miyoshi E
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 62 ページ: 1433-43
  • DOI: 10.1002/hep.28002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Is non-alcoholic fatty liver disease a systemic disease that promotes extrahepatic cancer development? (2015)
  • 著者名/発表者名: Ono M
  • 雑誌名: Hepatology Res 巻: 45 ページ: 711-3
  • DOI: 10.1111/hepr.12435
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Biphasic effect of alcohol intake on the development of fatty liver disease. (2015)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Ono M, Ono N, Eguchi T, Fujimoto K, Chayama K, Saibara T, Anzai K, Eguchi Y
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 50 ページ: 1114-23
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1058-z
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evidence-based clinical practice guidelines for nonalcoholic fatty liver disease/nonalcoholic steatohepatitis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watanabe S, Hashimoto E, Ikejima K, Uto H, Ono M, Sumida Y, Seike M, Takei Y, Takehara T, Tokushige K, Nakajima A, Yoneda M, Saibara T,Shiota G, Sakaida I, Nakamuta M, Mizuta T, Tsubouchi H, Sugano K, Shimosegawa T
  • 雑誌名: J Gastroenterol 巻: 50 ページ: 364-77
  • DOI: 10.1007/s00535-015-1050-7
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evidence-based clinical practice guidelines for nonalcoholic fatty liver disease/nonalcoholic steatohepatitis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Watanabe S, Hashimoto E, Ikejima K, Uto H, Ono M, Sumida Y, Seike M, Takei Y, Takehara T, Tokushige K, Nakajima A, Yoneda M, Saibara T,Shiota G, Sakaida I, Nakamuta M, Mizuta T, Tsubouchi H, Sugano K, Shimosegawa T
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 45 ページ: 363-77
  • DOI: 10.1111/hepr.12511
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] NASHはどれくらい存在するのか (2015)
  • 著者名/発表者名: 越智経浩，小野正文，西原利治
  • 雑誌名: Mebio 巻: 33 ページ: 4-9
• [雑誌論文] NASH/NAFLDおよび肥満研究の最前線 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小野正文，西原利治
  • 雑誌名: 分子消化器病 巻: 12 ページ: 165-70
• [雑誌論文] NAFLD、NASHの発症頻度はどれくらい？男女別および国内外の頻度について (2015)
  • 著者名/発表者名: 小野正文，西原利治
  • 雑誌名: Nutrition Care 巻: 8 ページ: 672-5
• [雑誌論文] 肝臓における糖代謝の最新知見 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小野正文，越智経浩，西原利治
  • 雑誌名: Diabetes Frontier 巻: 26 ページ: 287-96
• [雑誌論文] 尿酸血症と非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD・NASH） (2015)
  • 著者名/発表者名: 西原利治
  • 雑誌名: 尿酸と血糖 巻: 1 ページ: 55-58
• [学会発表] 高インスリン血症は糖尿病未発症NAFLD患者の肝線維化進展に重要な因子である． (2015)
  • 著者名/発表者名: 宗景玄祐，小野正文，西原利治
  • 学会等名: 第41回日本肝臓学会西部
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県・名古屋市）
  • 年月日: 2015-12-03 – 2015-12-04
• [学会発表] A novel noninvasive diagnostic method for nonalcoholic steatohepatitis（NASH） using two glycobiomarkers． (2015)
  • 著者名/発表者名: Kamada Y，Ono M，Hyogo H，Fujii H，Sumida Y，Mori K，Tanaka S，Yamada M，Akita M，Mizutani K，Fujii H，Yamamoto A，Takamatsu S，Yoshida Y，Itoh Y，Kawada N，Chayama K，Saibara T，Takehara T，Miyoshi E
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting
  • 発表場所: Sanfrancisco （USA）
  • 年月日: 2015-11-13 – 2015-11-17
  • 国際学会
• [学会発表] Risk factors for hepatocellular carcinoma recurrence in patients with nonalcoholic and alcoholic fatty liver disease： Japanese multicenter survey． (2015)
  • 著者名/発表者名: Kogiso T，Hashimoto E，Hyogo H，Nakajima T，Ono M，Kawaguchi T，Honda K，Eguchi Y，Nozaki Y，Kawanaka M，Imajo K，Sumida Y，Kamada Y，Fujii H，Suzuki Y，Tokushige K
  • 学会等名: A ASLD The Liver Meeting
  • 発表場所: Sanfrancisco （USA）
  • 年月日: 2015-11-13 – 2015-11-17
  • 国際学会
• [学会発表] 糖尿病発症前NAFLD患者の肝線維化進展に寄与する因子の解析-男女別の比較検討より- (2015)
  • 著者名/発表者名: 久家直子，小野正文，増田弘誠，宗景玄祐，越智経浩，西原利治
  • 学会等名: 第11回消化器病における性差医学・医療研究会
  • 発表場所: 旭川グランドホテル（北海道・旭川市）
  • 年月日: 2015-07-25
• [学会発表] 脂肪肝発症に対する性差の影響について-多施設検診受診者の解析より- (2015)
  • 著者名/発表者名: 黒川早紀，宗景玄祐，越智経浩，高橋宏和，兵庫秀幸，小野正文，江口有一郎，西原利治
  • 学会等名: 第11回消化器病における性差医学・医療研究会
  • 発表場所: 旭川グランドホテル（北海道・旭川市）
  • 年月日: 2015-07-25
• [学会発表] C型慢性肝炎患者とNAFLD患者の血糖日中変動に影響を及ぼす要因についての比較検討． (2015)
  • 著者名/発表者名: 越智経浩，小野正文，西原利治
  • 学会等名: 第101回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県・仙台市）
  • 年月日: 2015-04-23 – 2015-04-24
• [学会発表] PNPLA3遺伝子はER stressを介したapoptosisに関与する (2015)
  • 著者名/発表者名: 越智経浩，宗景玄祐，小野正文
  • 学会等名: 第101回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター（宮城県・仙台市）
  • 年月日: 2015-04-23 – 2015-04-24