研究課題
気管支喘息は成人の4～6％が罹患する最も頻度の高いアレルギー性呼吸器疾患である。近年の疫学調査により、喘息有病率は依然増加傾向にあることが示されている。この気管支喘息の増悪因子としては真菌の関与が示唆されている。さらに発症を負に制御する因子としてはBCG、ピロリ菌感染が示されている。興味深いことにこれらの疫学因子はすべて免疫においてはC型レクチンにより認識される。本研究ではC型レクチンに着目し気管支喘息の増悪、および抑制機構を明らかにすることを目的とした。まず、真菌の認識に関与することが知られているC型レクチンであるDectin-1、Dectin-2に着目し解析を行った。野生型マウス、およびDectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスにチリダニを経気管投与しアレルギー性気道炎症を惹起し、好酸球炎症、気道過敏性、CD4陽性T細胞分化を比較検討した。興味深いことにDectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスにおいては好酸球性炎症、気道過敏性ともに減弱していることが明らかとなった。また、Dectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスではTh2細胞分化のみならずTh17細胞分化も減弱していることが明らかとなった。現在は肺におけるDectin-1、Dectin-2の発現細胞を同定し、これらのC型レクチンがTh2細胞分化、Th17細胞分化を促進する分子機構を解析する予定である。
2: おおむね順調に進展している
申請時にはDectin-1、Dectin-2のみならずDC-SIGNなど他のC型レクチンも含めて網羅的に解析し、アレルギー性気道炎症における働きを明らかにすることを目的としていた。しかし、Dectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスを用いた解析により興味深い結果が相次いだこと、さらにはこれらのC型レクチンが気管支喘息における新規の治療標的となり得る可能性が示唆されたことから、これらのマウスの解析を先行させている。個々のC型レクチンの発現細胞の同定、細胞内シグナル解析に関してはDectin-1、Dectin-2の解析において用いている手法が他のC型レクチンの解析においても応用できると考えており、当初の研究予定からの変更はあったものの本研究計画は概ね順調に進展していると考える。
Dectin-1発現細胞の同定に用いる抗体は既に共同研究者より入手しており、FACSを用いて肺におけるDectin-1発現細胞同定に着手している。この方法によりDectin-1発現細胞が同定されれば、同細胞を単離しRNAシークエンスにより解析しDectin-1がアレルギー性気道炎症を増悪に導く分子機構を同定する。現時点ではDectin-2を特異的に認識しFACSに用いられる抗体は存在しないため、Dectin-2に対するモノクローナル抗体を作成中である。一方、肺における各細胞集団をFACSにより単離し、それぞれにおけるDectin-2mRNA発現を定量的PCR法により比較検討している。
当初の研究計画ではDectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスのみならずDC-SIGN欠損マウスに関しても解析を進める予定だった。しかし、昨年度はDectin-1欠損マウス、Dectin-2欠損マウスにおいて興味深い結果が得られたため、これらの解析を先行させた。このためDC-SIGN欠損マウスに関する解析は27年度以降に行うこととしたため次年度使用額が生じた。
DC-SIGN欠損マウスの入手、ならびに抗体購入
すべて 2015 2014 その他
すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 謝辞記載あり 5件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) 備考 (1件)
Mod Rheumatol
巻: in press ページ: in press
Arthritis Rheumatol
10.1002/art.39091
J Exp Med
巻: 211 ページ: 1857-74
10.1084/jem.20130791
Am J Respir Cell Mol Biol
巻: 51 ページ: 201-9
10.1165/rcmb.2013-0522OC
Arthritis Care Res (Hoboken)
巻: 66 ページ: 1576-81
http://www.m.chiba-u.ac.jp/class/allergy/research/index.html
