研究課題
Pax8-rtTA/LC-1ダブルトランスジェニックマウスとプロスタシン(Prss8) floxマウスを交配し、Pax8-rtTA/LC-1/Prss8flox/floxマウスを作成し、doxicycline投与により尿細管特異的にCreを誘導し、尿細管特異的プロスタシンKOマウス(TKO)を作成した。通常飼育下で24時間蓄尿を行った後にsacrificeした。TKOマウスでは尿中プロスタシン排泄が消失しており、尿中プロスタシンは尿細管細胞に由来することが確認できた。尿量、血中電解質・尿中電解質排泄を測定したが、コントロールとTKOで有意な差は認めなかった。24時間絶飲水とそれに引き続く水分負荷の負荷試験を行ったが、尿量・尿電解質排泄に差は認めなかった。TKOでは他のセリンプロテアーゼが誘導され代償的に作用している可能性も考えられ、尿中セリンプロテアーゼ活性をセリンプロテアーゼ特異的ザイモグラフィーで評価したが、使用した基質においてはコントロールとTKOで尿中セリンプロテアーゼ活性の変化を確認できなかった。続いてTKOマウスに当初の実験計画に従い、アルドステロンを浸透圧ポンプを用いて皮下持続投与し、同時に8.0%NaCl食を開始した後4週間飼育した。4週後の尿アルブミン排泄はTKOマウスで少ない傾向を認めた。またreal-timePCRで評価した腎障害マーカーの発現もTKOマウスで減弱している傾向を認めた。いずれも用いた動物数が少なく統計学的有意差は認めなかった。
3: やや遅れている
Pax8-rtTA/LC-1/Prss8flox/floxはトリプルトランスジェニックマウスであり、産仔を得る確率が低い。またコントロールとなるPax8-rtTA/ Prss8flox/floxもしくはLC-1/ Prss8flox/floxを効率的に同数得ることができず、研究の進行に遅れがでた。現在マウスの数が増え、安定した供給が可能となったため、引き続き実験と解析を行っている。
引き続きマウスにアルドステロンと食塩を負荷し、腎障害を誘導し、アルドステロンによる腎障害（特に尿細管間質病変）における尿細管プロスタシンの機能を解析する。また、交配中もしくは出産と同時にdoxicyclineを投与し、出産から離乳までの間に尿細管のプロスタシンを欠損させ、産後仔マウスが尿濃縮力（尿細管上皮機能の成熟）を獲得する過程における尿細管プロスタシンの役割を検討する。
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