新規抗血栓療法をめざしたインテグリンαIIbβ3活性化と活性化維持機構の解明

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26461403
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 加藤 恒 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (20705214)
• 研究分担者: 柏木 浩和 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (10432535) ; 冨山 佳昭 大阪大学, 医学部附属病院, 准教授 (80252667)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 血小板 / インテグリン活性化 / 血栓 / inside-outシグナル

研究実績の概要

本研究は血栓形成に必須の分子である血小板フィブリノゲン受容体インテグリンαIIbβ3の活性化機序を明らかとすることを目的に行っている。
定常状態における血小板αIIbβ3はフィブリノゲンに対して低親和性であるが血栓形成時にはinside-outシグナルによる速やかな活性化を受け血小板凝集を形成する。申請者らの樹立した巨核球系細胞株CMK細胞システムによる検討からαIIbβ3活性化状態の経時的変化に着目し、inside-outシグナルに重要な分子を同定、活性化制御機構を明らかとする試みを行うと同時に、血小板機能に異常を持つ症例解析も施行した。これらの試みの中で出血症状を呈する症例がinside-outシグナルで重要なRap1活性化を誘導するCalDAG-GEFI欠損が原因であることを見出した。さらに、これまで一般に行われてきたαIIbβ3活性化解析法ではなく、αIIbβ3活性化の経時的変化の観察を可能とするinitial velocity assayによる解析結果からCalDAG-GEFIがαIIbβ3を速やかに活性化させるために重要であるという新たな知見を見出した。この結果は新規抗血小板療法の開発にあたりαIIbβ3活性化のキネティクスが新たなターゲットと成り得ることを示唆しており、本年度は第38回日本血栓止血学会SPCシンポジウムでの講演発表、第78回日本血液学会教育講演において成果報告を行うとともに、アメリカ血液学会誌への論文発表を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Human CalDAG-GEFI deficiency increases bleeding and delays αIIbβ3 activation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kato H, Nakazawa Y, Kurokawa Y, Kashiwagi H, Morikawa Y, Morita D, Banno F, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 128 ページ: 2729-2733
  • DOI: 10.1182/blood-2016-03-704825
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 血小板機能異常症の診断 ―まれな出血傾向を見逃さないために― (2016)
  • 著者名/発表者名: 加藤 恒
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-10-14
  • 招待講演
• [学会発表] Integrin inside-out activation: the role of CalDAG-GEFI in platelet integrinαIIbβ3 activation (2016)
  • 著者名/発表者名: 加藤 恒
  • 学会等名: 第38回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 奈良春日野国際フォーラム(奈良県奈良市）
  • 年月日: 2016-06-16