造血幹細胞の骨髄球系分化におけるSATB1-MS4A3系の役割

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26461412
• 研究機関: 神戸松蔭女子学院大学
• 研究代表者: 佐藤 友亮 神戸松蔭女子学院大学, 人間科学部, 准教授 (20506307)
• 研究分担者: 石橋 知彦 大阪大学, 医学部附属病院, その他 (30722285) ; 横田 貴史 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60403200) ; 織谷 健司 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70324762)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: SATB1 / MS4A3 / 造血幹細胞

研究実績の概要

造血細胞におけるSATB1発現の意義を解析するため、SATB1/Tomato knock-in マウスを作成した。このマウスは、SATB1の片アレルに赤色蛍光を発するTomato遺伝子を置換している。
造血幹細胞分画（Lin- Sca1+ c-KitHi (LSK) CD150+ Flt3-）に、SATB1/Tomato+細胞が存在することがわかった。また、メチルセルロースコロニーアッセイによりSATB1/Tomato+造血幹細胞とSATB1/Tomato-造血幹細胞の両方が、多数のCFU-Mixおよび骨髄/単球系コロニーを生み出すが、SATB1/Tomato+造血幹細胞は、BFU-E（赤芽球系コロニー）の産生能力がSATB1/Tomato-造血幹細胞よりも低かった。移植実験では、SATB1/Tomato+造血幹細胞とSATB1/Tomato-造血幹細胞の両方がLSK CD150+ Flt3-の造血幹細胞分画を再構築したが、SATB1/Tomato+造血幹細胞の方がより強くBリンパ球系への分化傾向を示した。
さらに、これまでの研究において、ESAM(endothelial cell-selective adhesion molecule)がマウス造血幹細胞の機能的マーカーとして利用できることが分かっていることから、ヒト造血細胞におけるESAM発現について解析した。ヒト骨髄細胞、末梢血へ動員した骨髄細胞、臍帯血から、ESAM発現をもとに、ヒト造血幹細胞を単離できることがわかった。ESAM高発現CD34(+)CD38(-) 細胞は、多血球系統への分化能と、免疫不全マウスにおける長期骨髄再構築能を有していた。また、臍帯血細胞とコラゲナーゼ処理をした造血細胞におけるCD34(+)CD38(-)分画で認められる、極端にESAMの発現が強い細胞は、血管内皮系細胞であることが示唆された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

SATB1/Tomato ノックインマウスの解析が進んでいる。しかし、加齢とSATB1-MS4A3の関係性の解析がまだ進んでいない。

今後の研究の推進方策

正常造血幹細胞分化におけるSATB1-MS4A3系の意義をさらに検討していく。

次年度使用額が生じた理由

研究計画の進捗が一部遅れているところがあり、物品購入が先送りとなった。

次年度使用額の使用計画

研究の進行に合わせて、研究費を使用していく。

研究成果

• [雑誌論文] ESAM is a novel human hematopoietic stem cell marker associated with a subset of human leukemias. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishibashi T, Yokota T, Tanaka H, Ichii M, Sudo T, Satoh Y, Doi Y, Ueda T, Tanimura A, Hamanaka Y, Ezoe S, Shibayama H, Oritani K, Kanakura Y.
  • 雑誌名: Exp Hematol. 巻: 44 ページ: 269-281
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2015.12.010. Epub 2016 Jan 14.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Estrogen-inducible sFRP5 inhibits early B-lymphopoiesis in vivo, but not during pregnancy. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Oritani K, Sudo T, Ishibashi T, Doi Y, Habuchi Y, Ichii M, Fukushima K, Okuzaki D, Tomizuka K, Yamawaki K, Kakitani M, Shimono A, Morii E, Kincade PW, Kanakura Y.
  • 雑誌名: Eur J Immunol. 巻: 45 ページ: 1390-1401
  • DOI: 10.1002/eji.201444939. Epub 2015 Mar 16.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of osteoblast stimulating factor 5 as a negative regulator in the B-lymphopoietic niche. (2015)
  • 著者名/発表者名: Fujita N, Ichii M, Maeda T, Saitoh N, Yokota T, Yamawaki K, Kakitani M, Tomizuka K, Oritani K, Kanakura Y.
  • 雑誌名: Exp Hematol. 巻: 43 ページ: 963-973
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2015.07.002. Epub 2015 Jul 23.
  • 査読あり
• [学会発表] SATB1 Expression Marks Lymphoid-Lineage-Biased Hematopoietic Stem Cells in Mouse Bone Marrow. (2015)
  • 著者名/発表者名: Doi Y, Yokota T, Ishibashi T, Satoh Y, Ichii M, Tanimura A, Ezoe S, Shibayama H, Oritani K, Kanakura Y.
  • 学会等名: 57th ASH Annual Meeting and Exposition.
  • 発表場所: Orlando, FL
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-08
  • 国際学会
• [学会発表] ESAM Is a Novel Human Hematopoietic Stem Cell Marker Associated with a Subset of Human Leukemias (2015)
  • 著者名/発表者名: Ishibashi T, Yokota T, Tanaka H, Ichii M, Sudo T, Satoh Y, Doi Y, Tanimura A, Hamanaka Y, Ezoe S, Shibayama H, Oritani K, Kanakura Y.
  • 学会等名: 57th ASH Annual Meeting and Exposition.
  • 発表場所: Orlando, FL
  • 年月日: 2015-12-05 – 2015-12-08
  • 国際学会