インテグリンα8の骨髄内での発現・機能解析－多発性骨髄腫治療への応用に向けて－

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26461420
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 一井 倫子 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座助教 (30633010)
• 研究分担者: 金倉 譲 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20177489) ; 加藤 恒 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (20705214) ; 横田 貴史 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (60403200) ; 織谷 健司 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (70324762) ; 田所 誠司 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (80403062) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: インテグリン / 多発性骨髄腫

研究実績の概要

本研究の目的は、多発性骨髄腫におけるインテグリンα8の発現と機能を解析する事である。目的を達成するために、①骨髄腫患者腫瘍細胞、骨髄腫幹/前駆細胞、正常骨髄でのインテグリンα8の発現解析、②インテグリンα8およびインテグリン活性化に必須であるtalin-1の遺伝子を改変した骨髄腫細胞を用いた増殖能、浸潤能、骨髄生着能、アポトーシス、抗骨髄腫薬反応性　の解析、　③インテグリンα8の骨髄内リガンドの同定　を行う予定とした。昨年度までに行った②を中心とした機能解析では、インテグリンα8による増殖能や骨髄生着能への作用は明らかでなかった。
平成28年度には、主に①に関する実験を進めた。具体的には、患者検体から単離した腫瘍細胞を用いて腫瘍特異的プライマー(ASO-PCRプライマー)を患者毎に作成し、インテグリンα8のRNA発現との比較、および、末梢血中に存在する骨髄腫細胞の解析を中心に行う事とした。
末梢血・骨髄中のB前駆細胞、成熟B細胞、形質細胞、腫瘍細胞分画を分化段階毎に細分化して単離しRNA発現を解析したところ、インテグリンα8発現は、患者腫瘍特異的プライマーによる腫瘍細胞分画の発現にほぼ合致した。ただし、骨髄中のsIgM陽性CD20陽性B細胞分画では、ASO-PCRプライマーでのPCRで発現が確認されたのに対して、インテグリンα8の発現は認められなかった。これらの結果より、インテグリンα8の発現が骨髄腫細胞と完全に一致するのではないことが分かった。一方、末梢血においては腫瘍細胞量を反映する結果が得られた。ASO-PCR法は患者ごとにプライマーを設計する必要がある。インテグリンα8による末梢血のMRD測定が有用である可能性が考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Genetic abnormalities associated with acute lymphoblastic leukemia. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Kanakura Y
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 107 ページ: 721-725
  • DOI: 10.1111/cas.12927.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human CalDAG-GEFI deficiency increases bleeding and delays αIIbβ3 activation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kato H, Nakazawa Y, Kurokawa Y, Kashiwagi H, Morikawa Y, Morita D, Banno F, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Blood. 巻: 128 ページ: 2729-2733
  • DOI: 10.1182/blood-2016-03-704825.
  • 査読あり
• [雑誌論文] ESAM is a novel human hematopoietic stem cell marker associated with a subset of human leukemias. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishibashi T, Yokota T, Tanaka H, Ichii M, Sudo T, Satoh Y, Doi Y, Ueda T, Tanimura A, Hamanaka Y, Ezoe S, Shibayama H, Oritani K, Kanakura Y.
  • 雑誌名: Exp Hematol. 巻: 44 ページ: 269-281
  • DOI: 10.1016/ j.exphem. 2015.12.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelial cell-selective adhesion molecule expression in hematopoietic stem/progenitor cells is essential for erythropoiesis recovery after bone marrow injury. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sudo T, Yokota T, Okuzaki D, Ueda T, Ichii M, Ishibashi T, Isono T, Habuchi Y, Oritani K, Kanakura Y.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 11 ページ: e0154189
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0154189
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] SATB1 Expression Helps in Identification of the Lymphoid-Lineage-Biased Trajectory of Func-tionally Fluctuating Hematopoietic Stem Cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Doi Y, Yokota T, Satoh Y, Ueda T, Shingai Y, Ichii M, Tanimura A, Ezoe S, Shibayama H, Oritani K,
  • 学会等名: The American Society of Hematology 58th Annual Meeting
  • 発表場所: SanDiego convention center, SanDiego, CA, USA
  • 年月日: 2016-12-03 – 2016-12-06
• [学会発表] Anamorsin is essential for B-cell terminal differentiation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hamanaka Y, Shibayama H, Tanimura A, Yokota T, Ezoe S, Ichii M, Ishibashi T, Doi Y, Nagate Y, Oritani K, Kanakura Y
  • 学会等名: 21st Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Bella Center, Copenhagen, Denmark
  • 年月日: 2016-06-09 – 2016-06-12