急性骨髄性白血病の再発における遺伝子異常の解析

2014 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26461431
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 麻生 範雄 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (50175171)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 急性骨髄性白血病 / 再発 / 遺伝子変異 / サブクローン

研究実績の概要

本年度は主に急性骨髄性白血病症例の初発時と再発時における遺伝子異常の解析を行った。既知の遺伝子変異として染色体転座由来のAML1-ETO、CBFB-MYH11、PML-RARAおよびMLL転座などのキメラ遺伝子のPCRによる同定を行った。また、AMLにおいて遺伝子変異の頻度が高い異常として、NPM1、FLT3、CEBPA、IDH1、IDH2、DNMT3A、WT1およびTP53などの遺伝子変異の有無を検索した。NPM1変異例ではDNMT3A、FLT3、IDH1あるいはIDH2変異との共存を認めることが多かった。初発時と再発時のペア検体において、これらの共存する遺伝子変異が消失したり、新たに出現する場合が数例に認められた。これらの再発時に新たに獲得した遺伝子変異が初発時に微少なサブクローンとして存在したか、解析中である。
また、本年度は急性リンパ性白血病症例において数度の再発を繰り返すうちに急性骨髄性白血病へ転化した症例の遺伝子解析を行った。5回目の再発時にt(6;11)染色体転座を認め、MLL-MLLT4融合遺伝子が同定された。急性骨髄性白血病への転化時にもMLL-MLLT4キメラ遺伝子が確認され、同一クローンによる転化であることが示された。さらに、初発時にも同融合遺伝子を同定し、染色体検査では同定できなかったが、初発時にすでにMLL-MLLT4キメラ遺伝子クローンが存在したことを明らかにした。本例の急性リンパ性白血病から急性骨髄性白血病への形質転化に関わるその他の遺伝子変異について検索中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

計画に沿って、急性骨髄性白血病の初発および再発検体を用いて既知の遺伝子異常を解析した。再発時に新たに獲得した遺伝子変異は初発時に微少なサブクローンとして存在していたか、解析中である。また、再発時に消失した遺伝子変異についても初発時にメインクローンとは別のサブクローンではなかったか検討中である。これらの点に関して、実施計画の目的をほぼ予定通り達成していると考える。計画ではもうひとつ比較的大きな遺伝子異常をSNPアレイを用いて検討する予定であったが、こちらはあまり進んでいない。既知および未知の遺伝子異常に関して、次期に計画している全エクソンシーケンスにより網羅的に解析可能と考え、SNPアレイを用いた解析の一部変更を検討している。

今後の研究の推進方策

急性骨髄性白血病の再発時の遺伝子変異が初発時にも微少なサブクローンとして存在したか、あるいは新しく獲得したものであったかについて単一細胞PCRを用いて解析中である。次年度には初発時および再発時のペア検体における全エクソンシーケンスによる網羅的解析を行う予定である。これらの解析により急性骨髄性白血病における臨床上の最大の課題である再発の分子病態を明らかにし、予後予測としての臨床応用を検討する予定である。また、急性骨髄性白血病の発症や進展に関与する遺伝子変異は年々新たに報告されているので学会報告などにおける情報収集にも努めて、研究計画の推進に資す予定である。さらに、初発および再発のペア検体の症例数を増やすために他施設との共同研究を検討している。

研究成果

• [雑誌論文] IDH1 and IDH2 mutations confer an adverse effect in patients with acute myeloid leukemia lacking the NPM1 mutation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi S, Iwanaga E, Tokunaga K, Nanri T, Shimomura T, Suzushima H, Mitsuya H, Asou N.
  • 雑誌名: Euro J Haematol 巻: 92 ページ: 471-477
  • DOI: 10.1111/ejh.12271
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comprehensive analysis of genetic alterations and their prognostic impacts in adult acute myeloid leukemia patients. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kihara R, Nagata Y, Kiyoi H, Kato T, Yamamoto E, Suzuki K, Chen F, Asou N, Ohtake S, Miyawaki S, Miyazaki Y, Sakura T, Ozawa Y, Usui N, Kanamori H, Kiguchi T, Imai K, Uike N, Kimura F, Kitamura K, Nakaseko C, Onizuka M, Takeshita A, Ishida F, Suzushima H, Ogawa S, Naoe T.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 28 ページ: 1586-1595
  • DOI: 10.1038/leu.2014.55
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hematologic improvements in a myelodysplastic syndromes with myelofibrosis (MDS-F) patient treated with azacitidine. (2014)
  • 著者名/発表者名: Okamura D, Matsuda A, Ishikawa M, Maeda T, Tanae K, Kohri M, Takahashi N, Kawai N, Asou N, Bessho M.
  • 雑誌名: Leuk Res Rep 巻: 3 ページ: 24-27
  • DOI: 10.1016/j.lrr.2014.03.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tamibarotene as maintenance therapy for acute promyelocytic leukemia: Results from a randomized controlled trial. (2014)
  • 著者名/発表者名: Shinagawa K, Yanada M, Sakura T, Ueda Y, Sawa M, Miyatake J, Dobashi N, Kojima M, Hatta Y, Emi N, Tamaki S, Gomyo H, Yamazaki E, Fujimaki K, Asou N, Matsuo K, Ohtake S, Miyazaki Y, Ohnishi K, Kobayashi Y, Naoe T.
  • 雑誌名: J Clin Oncol 巻: 32 ページ: 3729-3735
  • DOI: 10.1200/JCO.2013.53.3570
  • 査読あり
• [学会発表] Prognostic Impact of Chromosomal Variation in Patients with Acute Promyelocytic Leukemia (APL); Analysis of 775 Cases Enrolled in the Japan Adult Leukemia Study Group APL Studies. (2014)
  • 著者名/発表者名: Adachi M, Takeshita A, Taki T, Ohtake S, Shinagawa K, Kiyoi H, Matsuda M, Takahashi M, Emi N, Kobayashi Y, Miyamura K, Fujita H, Sakura T, Iwanaga M, Usui N, Miyawaki S, Asou N, Ohnishi K, Miyazaki Y, Naoe T.
  • 学会等名: 56th ASH Annual Meeting and Exposition.
  • 発表場所: Moscone Center, San Francisco, CA, U.S.A.
  • 年月日: 2014-12-06 – 2014-12-09
• [学会発表] Alterations of TP53, CREBBP and EED genes in adult patients with acute lymphoblastic leukemia. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tokunaga K, Yamaguchi S, Shimomura T, Suzushima H, Mitsuya H, Asou N.
  • 学会等名: The 76th Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology.
  • 発表場所: 大阪国際会議場、大阪
  • 年月日: 2014-10-31 – 2014-11-02