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2016 年度 実績報告書

抗原の消化管透過性から見た食物アレルギー発症機序の解明

研究課題

研究課題/領域番号 26461488
研究機関広島大学

研究代表者

松尾 裕彰  広島大学, 病院(医), 教授 (60346385)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード食物アレルギー / 抗原 / 吸収
研究実績の概要

食物抗原の消化管透過量の違いは、食物アレルギーにおける抗原感作あるいはアレルギー症状の誘発に何らかの影響を及ぼしていると考えられている。したがって、抗原の消化管透過性をコントロールすることによる新しい食物アレルギー予防法や治療法の開発が期待される。本研究では、消化管の抗原透過性が食物アレルギーの病態にどのような影響を与えているかを明らかにすることを最終目的として質量分析計(LC-MS/MS)を用いた血中抗原測定法を構築し、抗原の消化管透過性の評価方法の確立を試みた。
LC-MS/MSを用いて卵アレルゲンであるOVAの測定に利用できるプレカーサーイオンとプロダクトイオンの組み合わせの検討を行い、OVA定量に利用可能なプレカーサーイオンとして6つの候補を選び、それぞれのトランジションを決定した。これら6つのプレカーサーイオンのOVA濃度とピーク面積の直線性を評価した結果、GGLEPINFQTAADQAR(2+)イオンがOVA測定に最も適したプレカーサーイオンであることを明らかにした。次に、ターゲットペプチドのC-末端に存在するアルギニンを安定同位体置換した標識ペプチドを内部標準として、LC-MS/MSを用いたMRM-HR法によるOVAの定量法の開発を試みた。その結果、抗OVA抗体を用いた免疫沈降によるOVAの濃縮後にトリプシン消化した試料をMRM-HR法により測定することで、ラット血漿中のOVAを0-150 ng/mLの濃度範囲で定量できることを明らかにした。さらに、この方法を用いて、50 mgのOVAを経口投与したラット血漿中に存在するOVAの濃度を実際に定量することに成功した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2017 2016

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Anaphylaxis provoked by ingestion of hydrolyzed fish collagen probably induced by epicutaneous sensitization.2016

    • 著者名/発表者名
      Fujimoto W, Fukuda M, Yokooji T, Yamamoto T, Tanaka A, Matsuo H.
    • 雑誌名

      Allergol Int.

      巻: 65 ページ: 474-476

    • DOI

      10.1016/j.alit.2016.03.012.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 小麦アレルゲン2016

    • 著者名/発表者名
      松尾裕彰
    • 雑誌名

      アレルギー・免疫

      巻: 24 ページ: 60-73

  • [学会発表] 質量分析法による卵白アレルゲン定量法の開発2017

    • 著者名/発表者名
      荻野龍平,大本亜沙妃,横大路智治,松尾裕彰
    • 学会等名
      日本皮膚科学会第132回山陰・第28回島根合同開催地方会
    • 発表場所
      出雲市
    • 年月日
      2017-03-05 – 2017-03-05
  • [学会発表] 質量分析法による血漿中卵アレルゲン定量法の開発2016

    • 著者名/発表者名
      荻野龍平,大本亜沙妃,横大路智治,松尾裕彰
    • 学会等名
      第55回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中四国支部学術大会
    • 発表場所
      岡山市
    • 年月日
      2016-11-05 – 2016-11-06
  • [学会発表] ラットモデルを用いたω5-グリアジン欠損小麦のアレルゲン活性測定2016

    • 著者名/発表者名
      二宮直紀,横大路智治,垰越崇範,森田栄伸,松尾裕彰
    • 学会等名
      第55回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中四国支部学術大会
    • 発表場所
      岡山市
    • 年月日
      2016-11-05 – 2016-11-06

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公開日: 2018-01-16  

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