分子病態に基づく血球貪食性リンパ組織球症の新規診療基盤開発

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26461582
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 八角 高裕 京都大学, 医学研究科, 講師 (00511891)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 血球貪食性リンパ組織球症 / 迅速診断 / 機能解析系の確立 / 細胞ライブラリー / バイオマーカー検索

研究実績の概要

血球貪食性リンパ組織球症（HLH）の病態解明を目的に、以下の項目について研究・解析を行った。
A）機能解析・蛋白発現解析・遺伝子解析による原発性HLHスクリーニング：前年度に引き続き、当科に解析依頼のあったHLH症例に対して、①NK細胞及びCTLの脱顆粒機能解析、②家族性HLH（FHL）の責任蛋白発現解析、③既知の原発性HLHの責任遺伝子解析を行い、FHL2（1症例）、FHL3（2症例）、XLP2（1症例）を診断した。二次性症例を含めて順調に症例の集積が進んでいる。
B）FHL遺伝子変異の機能解析系確立：FHL2とFHL3患者由来のアロ抗原特異的CTLライン、及び不死化CTL細胞株の作成に成功し、それぞれの細胞株にPRF1及びUNC13DのcDNAコンストラクトを強制発現させて、蛋白発現・脱顆粒機能・細胞傷害活性に与える影響を解析する系の確立に成功した。この系を用いて、これまで疾患原性の不明であった変異の解釈が可能となった。加えて、munc13-4分子の蛋白安定性や構造に関する知見も得られており、細胞傷害性顆粒の放出機構解析に寄与する事が期待される。
C）HLH患者由来iPS細胞ライブラリーの作成：FHL3症例由来iPS細胞株は作成済みである。その他のHLH症例由来の細胞も多数保存しており、必要に応じてiPS細胞を樹立する準備を整えている。
D）バイオマーカー解析によるHLH病態解析：FHL2/FHL3に加え、二次性HLH症例のCTLラインを作成・保存している。一部の検体については、トランスクリプトームやプロテオームを含めたマルチオミックス解析を開始している。

研究成果

• [雑誌論文] A CD57+ CTL degranulation assay effectively identifies familial hemophagocytic lymphohistiocytosis type 3 patients (2017)
  • 著者名/発表者名: Masayuki Hori, Takahiro Yasumi, Saeko Shimodera, Hirofumi Shibata, Eitaro Hiejima, Hirotsugu Oda, Kazushi Izawa, Tomoki Kawai, Masataka Ishimura, Naoko Nakano, Ryutaro Shirakawa, Ryuta Nishikomori, Hidetoshi Takada, Satoshi Morita, Hisanori Horiuchi, Osamu Ohara, Eiichi Ishii, and Toshio Heike
  • 雑誌名: Journal of Clinical Immunology 巻: 37 ページ: 92-99
  • DOI: 10.1007/s10875-016-0357-3
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 家族性血球貪食症候群（FHL）3型における迅速診断系・機能解析系の確立 (2016)
  • 著者名/発表者名: 柴田洋史、八角高裕、日衛嶋栄太郎、中川権二、井澤和司、河合朋樹、小原收、平家俊男
  • 学会等名: 第44回日本臨床免疫学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル
  • 年月日: 2016-09-08 – 2016-09-09
• [備考] 京都大学医学部附属病院小児科
  • URL: http://www.kuhp.kyoto-u.ac.jp/~pediatrics/