消化器癌におけるエピゲノム関連酵素ＴＥＴファミリーおよび5-hmCの解析

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26461953
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 宮成 信友 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (90336230)
• 研究分担者: 馬場 祥史 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 講師 (20599708) ; 志垣 博信 熊本大学, 医学部附属病院, 診療助手 (30594874) ; 渡邊 雅之 公益財団法人がん研究会, その他部局等, 食道担当部長 (80254639)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 5-hmC / 脱メチル化 / TET酵素 / 食道癌

研究実績の概要

食道癌細胞におけるDNAの脱メチル化機構に関わると考えられているTET酵素および5-hmCの消化器癌における発現の意義を検討することが当研究の目的である。前年度はDNAの抽出および5-hmCの定量を行ったが、当年度においてはまず食道扁平上皮癌切除症例のうち、当施設の凍結切片77例と共同研究施設である九州がんセンターの凍結切片29例からRNAを抽出した。そしてTET酵素群の発現をqRT-PCRを用いて定量し癌部と非癌部で比較したところ、TET1の癌部はmedian: 0.019; mean: 0.022; SD: 0.02、非癌部はmedian: 0.015; mean: 0.018; SD: 0.01で、両者を比較すると P = 0.23とほぼ同等であった。TET2の癌部はmedian: 0.045; mean: 0.053; SD: 0.03、非癌部はmedian: 0.087; mean: 0.090; SD: 0.03で、比較すると P < 0.0001と癌部が有意に低値であった。
また、5-hmCとTET酵素群の発現量の相関関係について解析した結果、TET1とTET3はそれぞれP = 0.306、P = 0.927で有意な相関関係は認めなかった。一方、TET2はP = 0.003で有意な相関関係を認めた。よって5-hmCとTET2の減少は食道癌の癌化において重要な役割を担っていると考えられ、これらの結果はOncotargetという癌研究分野の一流誌に既に掲載された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

計画書に記した予定通りに研究は遂行され、意義深い結果が得られている。これらの結果は、Oncotargetという癌研究分野の一流誌に既に採択されている。

今後の研究の推進方策

今後は、食道癌5-ｈｍCレベルおよびTET酵素群が抗癌剤感受性の関連について研究を進めていく予定である。また、食道癌細胞株を用いたin vitroの研究も開始する予定であり、準備を行っている。食道癌細胞株の5-ｈｍC 、TET酵素群の値を測定し、in vitroでの癌細胞浸潤能、増殖能、細胞サイクル、Docetaxel感受性などとの関係を評価する。

次年度使用額が生じた理由

医局内保管の消耗品を使用することが出来たため。

次年度使用額の使用計画

今後は、食道癌5-ｈｍCレベルおよびTET酵素群が抗癌剤感受性の関連について研究を進めていく予定である。また、食道癌細胞株を用いたin vitroの研究も開始する予定であり、今年度以上の実験消耗品を要する予定である。次年度はそれらの購入費に研究費を充てたいと考える。また、データ管理、資料作成を補佐する事務補佐員の人件費としても使用したいと考える。

研究成果

• [雑誌論文] TET family proteins and 5-hydroxymethylcytosine in esophageal squamous cell carcinoma. (2015)
  • 著者名/発表者名: Murata A, Baba Y, Ishimoto T, Miyake K, Kosumi K, Harada K, Kurashige J, Iwagami S, Sakamoto Y, Miyamoto Y, Yoshida N, Yamamoto M, Oda S, Watanabe M, Nakao M, Baba H
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 6（27） ページ: 23372-82
  • DOI: 10.18632/oncotarget.4281
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] LINE-1 methylation level and patient prognosis in a database of 208 hepatocellular carcinomas. (2015)
  • 著者名/発表者名: Harada K, Baba Y, Ishimoto T, Chikamoto A, Kosumi K, Hayashi H, Nitta H, Hashimoto D, Beppu T, Baba H
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 22（4） ページ: 1280-7
  • DOI: 10.1245/s10434-014-4134-3.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between LINE-1 hypomethylation and Helicobacter pylori infection in gastric mucosae. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kosumi K, Baba Y, Ishimoto T, Harada K, Miyake K, Izumi D, Tokunaga R, Murata A, Eto K, Sugihara H, Shigaki H, Iwagami S, Sakamoto Y, Miyamoto Y, Yoshida N, Watanabe M, Komohara Y, Takeya M, Baba H
  • 雑誌名: Med Oncol 巻: 32（4） ページ: 117
  • DOI: 10.1007/s12032-015-0571-5
  • 査読あり