| 研究課題/領域番号 |
26462046
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
生田 義明 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (70452894)
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| 研究分担者 |
近本 亮 熊本大学, 医学部附属病院, 准教授 (10419640)
馬場 秀夫 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (20240905)
林 洋光 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (80625773)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | TSP-1 / 肝萎縮 / 門脈血流低下 / 肝類洞内皮細胞 / 増殖抑制 / アポトーシス |
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| 研究実績の概要 |
門脈血流低下による肝萎縮において障害を受けた肝類洞内皮細胞からTSP-1分泌が誘導され、TGF-β-Smadシグナルを活性化することで肝萎縮が誘導されていると予想される。野生型マウス（C57BL/6J）を用いて左右門脈のうち右門脈を結紮して部分的な肝萎縮を誘導した。門脈の結紮を行った肝右葉を結紮肝、結紮を行わなかった肝左葉を非結紮肝とした。門脈結紮したマウスは術後6時間、24時間、48時間後にsacrificeし、結紮肝および非結紮肝を摘出した。各タイミングで５匹の門脈結紮マウスを作成した。
摘出した肝臓は緩衝ホルマリン液に固定し、ヘマトキシリン・エオジン染色、抗PCNA抗体による免疫染色、TUNEL染色を行った。結紮肝（萎縮肝）では術後６時間以降に類洞の拡張を認め、48時間以降で肝細胞核におけるヘマトキシリンの染色性が低下した。また、PCNAの発現は結紮後６時間をピークに上昇し、その後発現は低下した。TUNEL染色は術後６時間後核の染色が増加した。一方、非結紮肝（肥大肝）では術後６時間以降、PCNAの発現が上昇した。TUNEL染色では核の染色は認めなかった。抗TSP-1抗体および抗pSmad2抗体による免疫染色にて結紮肝では術後６時間以降、肝細胞細胞質でのTSP-1の発現は上昇し、核でのpSmad2の発現も上昇した。非結紮肝では肝細胞細胞質内でのTSP-1の発現、核でのpSmad2の発現を認めなかった。
また、肝切除術のため、門脈結紮術を行ったヒトの結紮肝、非結紮肝に対してcDNA microarrayを行い、132遺伝子のうち、TSP-1が非結紮肝に比較して結紮肝で発現が最も発現が上昇していた。
すなわち、門脈血流の低下は肝細胞におけるTSP-1の発現上昇を促し、TGF-β/Smad2シグナルを介して肝細胞の増殖抑制とアポトーシスが誘導されていることが示唆された。
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