膵癌間質のプロテオーム解析

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26462070
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 遠藤 格 横浜市立大学, 医学研究科, 教授 (60211091)
• 研究分担者: 廣島 幸彦 横浜市立大学, 医学研究科, 客員研究員 (60718021) ; 森 隆太郎 横浜市立大学, 医学部, 講師 (90596412)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 膵癌 / 浸潤 / 転移 / 免疫 / 膵炎 / Kras / CRMP4

研究実績の概要

【CRMP4の高発現、低発現の膵癌細胞株を用いたCRMP4リン酸化の意義の検証】
（１）CRMP4安定発現株の樹立：CRMP4-EGFPをCRMP4低発現株であるPanc1に導入し、安定発現株を樹立し、浸潤能、転移能を比較検討する。本年度までに申請者らはPanc1-CRMP4-EGFPの安定発現株の樹立に成功した。また、コントロールとして、Panc1-EGFPの安定発現株を樹立し、浸潤能を比較検討した結果、Panc1-CRMP4-EGFPにおいて、有意にフィロポディア（糸状仮足；細胞の浸潤に不可欠）形成と浸潤能の増加を認めた（未発表データ）。今後は本細胞株を用い、CRMP4リン酸化酵素、阻害薬の効果の検証を行っていく予定である。
【CRMP4ノックアウトマウスを用いた膵癌自然発癌モデルの作成】
KrasG12Dマウスを入手し、CRMP4ノックアウトマウスとの交配、飼育を行っており、少数匹であるがCRMP4ノックアウトマウス（KrasG12D/Pdx-Cre/Crmp4-/-）の獲得に成功した。また、慢性膵炎は膵癌発症リスクを13倍以上になることが報告されており、膵癌発癌の強いリスク因子と考えられ、我々はマウスの急性膵炎モデル、慢性膵炎モデルにおいて主に間質に浸潤したT細胞と一部腺房細胞の細胞質にCRMP4が発現しており、かつリン酸化されていることを解明した（Sato S, et al, J Hepatobiliary Pancreat Sci, 2016）。T細胞にCRMP4が発現していることからCRMP4は免疫系にも関わっていることが示唆された。さらにKrasG12D/Pdx-Creマウスの急性膵炎モデルで前癌病変を確認した。現在KrasG12D/Pdx-Cre/Crmp4-/-の急性膵炎モデルの前癌病変と比較し、異形成の程度、病変の進展範囲の比較解析を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Caerulein-induced pancreatitis augments the expression and phosphorylation of collapsin response mediator protein 4. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sato S, Nakamura F, Hiroshima Y, Nagashima Y, Kato I, Yamashita N, Goshima Y, Endo I.
  • 雑誌名: J Hepatobiliary Pancreat Sci. 巻: 23 ページ: 422-431
  • DOI: 10.1002/jhbp.361
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Patient-derived mouse models of cancer need to be orthotopic in order to evaluate targeted anti-metastatic therapy. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hiroshima Y, Maawy A, Zhang Y, Zhang N, Murakami T, Chishima T, Tanaka K, Ichikawa Y, Bouvet M, Endo I, Hoffman RM.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 7 ページ: 71696-71702
  • DOI: 10.18632/oncotarget.12322
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effective fluorescence-guided surgery of liver metastasis using a fluorescent anti-CEA antibody. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hiroshima Y, Lwin TM, Murakami T, Mawy AA, Kuniya T, Chishima T, Endo I, Clary BM, Hoffman RM, Bouvet M.
  • 雑誌名: J Surg Oncol. 巻: 114 ページ: 951-958
  • DOI: 10.1002/jso.24462
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effective molecular targeting of CDK4/6 and IGF-1R in a rare FUS-ERG fusion CDKN2A-deletion doxorubicin-resistant Ewing's sarcoma patient-derived orthotopic xenograft (PDOX) nude-mouse model. (2016)
  • 著者名/発表者名: Murakami T, Singh AS, Kiyuna T, Dry SM, Li Y, James AW, Igarashi K, Kawaguchi K, DeLong JC, Zhang Y, Hiroshima Y, Russell T, Eckardt MA, Yanagawa J, Federman N, Matsuyama R, Chishima T, Tanaka K, Bouvet M, Endo I, Eilber FC, Hoffman RM.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 7 ページ: 47556-47564
  • DOI: 10.18632/oncotarget.9879
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Modified Liver Hanging Maneuver for En-bloc Right-sided Hepatectomy Combined with Total Caudate Lobectomy for Colon-Cancer Liver Metastasis and Hepatocellular Carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Hiroshima Y, Matsuo K, Kawaguchi D, Kikuchi Y, Endo I, Koda K, Togo S, Hoffman RM, Tanaka K.
  • 雑誌名: Anticancer Res. 巻: 36 ページ: 1729-1735
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] The relationship between pancreatic cancer and phosphorylation mechanism of CRMP4 (2016)
  • 著者名/発表者名: Keiichi Y, Nakamura F, Sato S, Hiroshima Y, Goshima Y, Endo I
  • 学会等名: IAP/JPS/AOPA joint meeting 2016
  • 発表場所: Sendai International Center (Miyagi)
  • 年月日: 2016-08-04 – 2016-08-07
  • 国際学会