| 研究課題/領域番号 |
26462252
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
檜山 明彦 東海大学, 医学部, 講師 (00514382)
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| 研究分担者 |
酒井 大輔 東海大学, 医学部, 准教授 (10408007)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 椎間板変性 / ﾌﾟﾛｽﾀﾉｲﾄﾞ / Ｗｎｔｼｸﾞﾅﾙ / ＥＰ受容体 |
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| 研究実績の概要 |
【目的】ﾌﾟﾛｽﾀﾉｲﾄﾞのうちﾌﾟﾛｽﾀｸﾞﾗﾝｼﾞﾝ(PG)E2は炎症や疼痛など多彩かつ､時に相反する作用を有する｡ 近年､その受容体であるEP受容体のｱｲｿﾌｫｰﾑが､軟骨分化や軟骨代謝の特異的ｼｸﾞﾅﾙ伝達に関与しており､軟骨変性過程において重要な役割をはたす事が報告されている｡しかしながら椎間板細胞におけるその機能や発現については未知である。そこで平成26年度は、椎間板細胞におけるEP受容体の発現と椎間板細胞分化に関わるWntｼｸﾞﾅﾙとPGE2による発現制御を解析した｡ 実験はSprague-Dawleyﾗｯﾄ(n=24､11週齢)から採取した椎間板細胞を用いた｡
【実験】実験1:椎間板細胞中のEP受容体のｱｲｿﾌｫｰﾑ (EP-1､ -2､ -3､-4) の遺伝子発現について解析した｡実験2: Tcf binding motifをもつﾚﾎﾟｰﾀｰﾌﾟﾗｽﾞﾐﾄﾞであるTopflashを遺伝子導入しPGE2刺激後の転写活性を評価した｡実験3: PGE2刺激後のWnt関連遺伝子の遺伝子発現について解析した｡
【結果】1: 髄核細胞､線維輪細胞ともにEP受容体 (EP-1､-2､-3､-4) の遺伝子発現を認めた｡EP-2､-3､-4の遺伝子発現は髄核細胞よりも線維輪細胞で発現が強かった｡髄核細胞中ではEP-1､EP-4､EP-3､EP-2の順に遺伝子発現が高かった｡2: 髄核細胞､線維輪細胞ともにPGE2 (50μM､24時間)刺激後においてTopflashの転写活性の上昇を認めた｡3: PGE2刺激後Wnt関連遺伝子の発現上昇を認めた｡
【考察】椎間板細胞中におけるEP受容体の発現を認めた｡平成26年度の解析から､PGE2/EP受容他を介したpathwayがWntｼｸﾞﾅﾙを活性化させ､椎間板細胞分化を誘導した可能性が示唆された｡
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の研究計画に準じて実験が遂行できていると考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成27年度は大型動物椎間板変性ﾓﾃﾞﾙやTop-galﾄﾗﾝｽｼﾞｪﾆｯｸﾏｳｽにおけるWntｼｸﾞﾅﾙとｱﾗｷﾄﾞﾝ酸ｶｽｹｰﾄﾞとの分子ﾒｶﾆｽﾞﾑを明らかにすることを目的として実験を遂行する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度旅費の使用分がなかったため
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| 次年度使用額の使用計画 |
平成27年度は研究成果を国内外で発表する予定であり、適切な研究費使用を行う。
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