| 研究課題/領域番号 |
26462274
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
村田 博昭 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員講師 (90360031)
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| 研究分担者 |
小藤 和孝 明治国際医療大学, 公私立大学の部局等, 講師 (50649340)
芦原 英司 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (70275197)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ビスホスホネート / 転移性骨腫瘍 / 骨肉腫 / 軟部肉腫 / parathyroid Hormone / 超音波 |
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| 研究実績の概要 |
これまでに、骨肉腫や線維肉腫などへのビスホスホネート（BP）の直接的な抗腫瘍効果について報告してきた。しかし、BPは投与後速やかに骨へ移行するために血中半減期は短く、また血中最大濃度も低いことが報告されている。本研究では長時間薬剤と接触させることにより、さらなる治療効果を得ることができると考え、骨転移巣の腫瘍局所制御を目的とした1つの方法として、BP含有徐放剤を用いた悪性細胞株に対する抗腫瘍効果を検討することであった。
細胞株は骨肉腫細胞株（LM8）を用いた。BPはZoledronate（ZOL）を用い、BP含有ハイドロキシアパタイト（HA）はZOL9mgをHA3gに含有させて作製し、24時間後に硬化を確認した。これを10mlのメディウムに浸し、24時間後にメディウムを回収し、同量のメディウムに交換した。この操作を10日間行った。HA単独、メディウム単独についても同様に、計3群で行った。回収したメディウムを用いてLM8を72時間培養し、細胞増殖抑制効果をTrypanblue染色法で、細胞周期の変化、Sub-G1の増加をフローサイトメトリーで検出した。
結果はZOL含有HA群では8日目まで有意差をもって増殖抑制効果を認めた。S期での細胞数、Sub-G1は共に増加したが、7日目以降、 S期の細胞数は減少し、Sub-G1の増加も認めなかった。ZOL含有HAは、ZOL単独投与と同様に細胞増殖を抑制し、細胞周期をS期で停止させ、Sub-G1期の細胞数を増加させたことから、長期間にわたりZOLを放出したと考えた。BPs含有HAはdrug delivery systemとして期待できると考えた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
ビスホスホネート（BP）含有徐放剤を用いた骨肉腫細胞株に対する抗腫瘍効果があることを検証できた。ただ、各種細胞株の増殖安定性が悪かったため細胞株のコンディションを整えることに時間がかかり計画は予定より遅れた。現在他の細胞株での効果、BPを含有する材料を骨セメントなどに変えての効果などでの同様の実験を行い、結果が得られはじめ比較検討中である。
実験動物を用いての転移性骨腫瘍の評価実験の検討に関しては実験動物への腫瘍細胞導入が難しく現在試行検討中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
ビスホスホネート（BP）含有徐放剤を用いた抗腫瘍効果を他の各種悪性細胞株についても確認する。また、実験動物への腫瘍細胞導入の安定した導入が得られればBP含有徐放剤を用いた併用効果の局所、転移評価を行う予定である。
また、もう一つのテーマである骨芽細胞、悪性腫瘍細胞に対するparathyroid Hormone(PTH)の細胞増殖への検討もあわせて行っていく予定である。また、PTHとlow-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) 併用療法による悪性腫瘍細胞存在下での骨芽細胞増殖、分化への影響ならびにBP併用による増殖に与える影響に関する検討する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
各種細胞株の増殖安定性が悪かったため細胞株のコンディションを整えることに時間がかかり計画は予定より遅れ、学会発表などもできなかったため残額が発生した。
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| 次年度使用額の使用計画 |
本年度の予定でできなかった他の悪性腫瘍細胞株に対するビスホスホネート徐放効果に関する実験や実験動物を用いた転移性骨腫瘍局所制御に関する研究に使用する予定である。
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