グリオスタチンは関節リウマチの新規治療ターゲットとなりうる

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26462309
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 永谷 祐子 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (90291583)
• 研究分担者: 大塚 隆信 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (10185316) ; 浅井 清文 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (70212462)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 関節リウマチ / 滑膜細胞 / グリオスタチン / チミジンホスホリラーゼ / マトリックスメタロプロテイナーゼ

研究実績の概要

関節リウマチ(RA)の病態にグリオスタチンが密接に関与していることを我々は初めて見いだし報告している。これまでの基礎研究成果に基づき、(1) RAにおける関節破壊へのグリオスタチンの関与を解明すること、(2) グリオスタチン遺伝子の発現から関節炎惹起活性の発現に至る諸相を阻害することにより、RAの病勢を緩和する方法を確立することを最終目標としている。本研究では、関節リウマチ滑膜炎寛解のためグリオスタチンが治療のターゲットとなりえることを明らかにすることを目標とした。
RA患者の人工膝関節置換術の際に、患者の承諾を得て採取した滑膜を培養し、形態学的に均一な線維芽細胞様滑膜培養細胞(FLSs)を用いた。FLSsにおいてグリオスタチン産生は、TNF-αまたグリオスタチンそのもので誘導された。すなわちグリオスタチンにはautocrine作用があり、これによりRA病態の慢性化、炎症の持続性が生じると考えられる。本研究ではさらにグリオスタチンによるmatrix metalloproteinases (MMPs)の誘導が確認された。MMP-1、MMP-3、 MMP-9の誘導が顕著であった(RT-PCR法)。MMP-1、MMP-3についてはELISA法にてタンパク質レベルでの誘導も確認できた。またゼラチンザイモグラフィによりMMP-9の酵素活性も増強されることが明らかとなった。MMP-2産生についてはグリオスタチン刺激の影響はなく恒常的な発現が確認された。グリオスタチンにはautocrine作用およびMMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13はミスラマイシンよって抑制されることを明らかにした。
以上のことよりグリオスタチンautocrine作用の連鎖を断ち切り、関節破壊に関連の強いMMPs発現を抑制する薬剤を検索することで、生物学的製剤不応症例のRA病態抑制に迫る可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] CXCR4+CD45- cells are niche forming for osteoclastogenesis via the SDF-1, CXCL7, and CX3CL1 signaling pathways in bone marrow. (2016)
  • 著者名/発表者名: Goto Y, Aoyama M, Sekiya T, Waguri-Nagaya Y, Miyazawa K, Asai K, Goto S.
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 34 ページ: 2733-2743
  • DOI: 10.1002/stem.2440
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Regulation by AMP-activated protein kinase of PGE2-induced osteoprotegerin synthesis in osteoblasts. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kainuma S, Otsuka T, Kuroyanagi G, Yamamoto N, Matsushima-Nishiwaki R, Kozawa O, Tokuda H. Regulation by AMP-activated protein kinase of PGE2-induced osteoprotegerin synthesis in osteoblasts.
  • 雑誌名: Mol Med Rep 巻: 13 ページ: 3363-3369
  • DOI: 10.3892/mmr.2016.4900
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Possible involvement of AMP-activated protein kinase in PGE(1)-induced synthesis of osteoprotegerin in osteoblasts. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kainuma S, Otsuka T, Kuroyanagi G, Yamamoto N, Matsushima-Nishiwaki R, Kozawa O, Tokuda H.
  • 雑誌名: Exp Ther Med 巻: 11 ページ: 2042-2048
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Thrombin Receptor-Activating Protein (TRAP)-Activated Akt Is Involved in the Release of Phosphorylated-HSP27 (HSPB1) from Platelets in DM Patients. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tokuda H, Kuroyanagi G, Tsujimoto M, Matsushima-Nishiwaki R, Akamatsu S, Enomoto Y, Iida H, Otsuka T, Ogura S, Iwama T, Kojima K, Kozawa O.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci 巻: 17 ページ: E737
  • DOI: 10.3390/ijms17050737
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Heat shock protein 22 (HSPB8) limits TGF-β-stimulated migration of osteoblasts. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto N, Tokuda H, Kuroyanagi G, Kainuma S, Matsushima-Nishiwaki R, Fujita K, Kozawa O, Otsuka T.
  • 雑誌名: Mol Cell Endocrinol 巻: 436 ページ: 1-9
  • DOI: doi: 10.1016/j.mce.2016.07.011
  • 査読あり
• [学会発表] 関節リウマチ線維芽細胞様滑膜細胞に置いてグリオスタチンによって誘導されたMMPsはSp１阻害剤によって抑制される. (2016)
  • 著者名/発表者名: 立松 尚衞, 永谷祐子, 川口洋平, 生田憲史, 小栗雄介, 小林正明,野崎正浩, 青山峰芳, 浅井清文, 大塚隆信.
  • 学会等名: 第31回日本整形外科基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場 (福岡県, 福岡市)
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] グリオスタチン発現抑制はリウマチ滑膜細胞に対するJAK阻害剤の新規作用機序である. (2016)
  • 著者名/発表者名: 川口洋平, 永谷祐子, 立松 尚衞, 小林正明, 後藤英之, 野崎正浩, 青山峰芳, 浅井清文, 大塚隆信.
  • 学会等名: 第31回日本整形外科基礎学術集会
  • 発表場所: 福岡国際会議場 (福岡県, 福岡市)
  • 年月日: 2016-10-13 – 2016-10-14
• [学会発表] 関節リウマチ線維芽細胞様滑膜細胞においてTNF alfaによるグリオスタチンの発現は JAK阻害剤により抑制される. (2016)
  • 著者名/発表者名: 川口洋平, 永谷祐子, 小林正明, 後藤英之, 野崎正浩, 青山峰芳, 浅井清文, 大塚隆信.
  • 学会等名: 第160回名古屋市立大学医学会例会.
  • 発表場所: 名古屋市立大学大学院医学研究科研究棟 (愛知県 .名古屋市)
  • 年月日: 2016-06-20
• [学会発表] The JAK inhibitor (Tofacitinib) inhibits TNF-induced gliostatin/thymidine phosphorylase expression in human fibroblast-like synoviocytes. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi Y, Waguri-Nagaya Y, Tatematsu N, Kobayashi M, Goto H, Nozaki M, Ikuta K, Aoyama M, Asai K, Otsuka T.
  • 学会等名: Annual European Congress of Rheumatology (EULAR2016)
  • 発表場所: ExCel London, London (United Kingdom)
  • 年月日: 2016-06-08 – 2016-06-11
  • 国際学会
• [学会発表] Sp1 interference prevents joint destruction of RA through inhibitory effects of gliostatin and matrix metalloproteinase-3. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ikuta K, Kawaguchi Y, Waguri-Nagaya Y, Tatematsu N, Kobayashi M, Goto H, Nozaki M, Aoyama M, Asai K, Otsuka T.
  • 学会等名: Annual European Congress of Rheumatology (EULAR2016)
  • 発表場所: ExCel London, London (United Kingdom)
  • 年月日: 2016-06-08 – 2016-06-11
  • 国際学会
• [学会発表] Sp1 inhibitor modulates the autocrine action of gliostatin/thymidine phosphorylase (GLS/TYMP) in rheumatoid fibroblast-like synoviocytes. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tatematsu N, Waguri-Nagaya Y, Kawaguchi Y, Ikuta K, Kobayashi M, Goto H, Nozaki M, Aoyama M, Asai K, Otsuka T.
  • 学会等名: Annual European Congress of Rheumatology (EULAR2016)
  • 発表場所: ExCel London, London (United Kingdom)
  • 年月日: 2016-06-08 – 2016-06-11
  • 国際学会
• [学会発表] 関節リウマチ患者の血清 N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline(AcSDKP) 濃度は治療の有効性を反映している. (2016)
  • 著者名/発表者名: 立松 尚衞, 永谷 祐子, 川口 洋平, 井之上 浩一, 浅井 清文, 大塚 隆信.
  • 学会等名: 第89回日本整形外科学会学術集会.
  • 発表場所: パシフィコ横浜 (神奈川県, 横浜市)
  • 年月日: 2016-05-12 – 2016-05-15
• [学会発表] トファシチニブ投与RA患者の臨床像と血清グリオスタチンへの影響の検討. (2016)
  • 著者名/発表者名: 川口洋平, 永谷祐子, 立松尚衛, 小林正明, 後藤英之, 野崎正浩, 小栗雄介, 浅井清文, 大塚隆信.
  • 学会等名: 第60回日本リウマチ学会総会・学術集会.
  • 発表場所: パシフィコ横浜 (神奈川県, 横浜市)
  • 年月日: 2016-04-21 – 2016-04-23