• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2014 年度 実施状況報告書

生理的低酸素環境の再現による軟骨細胞のストレス応答機構の究明

研究課題

研究課題/領域番号 26462312
研究機関京都府立医科大学

研究代表者

新井 祐志  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50347449)

研究分担者 久保 俊一  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20178031)
中川 周士  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (30643382)
土田 真嗣  京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10719834)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード変形性関節症 / 低酸素環境 / HIF-1α / HSP70
研究実績の概要

本研究の目的は,低酸素環境における軟骨細胞のストレス応答機構をanabolicな作用を軸に解析し,OAに対する新たな保存療法の道を開くことである.平成26年度は日本白色家兎の正常軟骨細胞を用いて,1%, 2%,5%,20%の低酸素環境で培養した.また,様々な時間(24,48,72時間)で低酸素環境下培養を行った.HIF-1αおよびHSP70の遺伝子発現をreal-time RT-PCRで,蛋白発現をWestern blottin法で解析した.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

まず,酸素濃度の影響では,HIF-1αのmRNAの発現は,酸素濃度の低下に従って発現が亢進した.HSP70のmRNAの発現も同様であった.HIF-1αの蛋白発現は,酸素濃度の低下に従って発現が亢進した.HSP70の蛋白発現も同様であった.次に,低酸素環境下での培養時間の影響では,HIF-1αのmRNAの発現は,12時間以降,約7倍有意に上昇し,72時間までほぼ一定の発現を示した.HSP70のmRNAの発現は,12時間で約7倍有意に上昇し,24時間以降で約12倍,72時間までほぼ一定の発現を示した.蛋白発現は,HIF-1αおよびHSP70ともにmRNAの発現と同様の発現動態を示した.

今後の研究の推進方策

以上の結果から,今後の培養条件は,酸素濃度1%,24時間が適切であると考える.平成27年度以降は,HIF-1αのchemical inducerやsiRNAを用いて,同様にHIF-1αおよびHSP70のmRNA発現および蛋白発現を解析する予定である.これにより,HIF-1αとHSP70が互いに及ぼす影響が明らかとなると考える.また,HIF-1αおよびHSP70がtype 2 collagenやaggrecanを始めとする軟骨基質蛋白の発現へ与える影響を解析する.

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] HIF-1a-Induced HSP70 Regulates Anabolic Responses in Articular Chondrocytes under Hypoxic Conditions2014

    • 著者名/発表者名
      Shinji Tsuchida, Yuji Arai, Kenji A. Takahashi, Tsunao Kishida, Ryu Terauchi, Kuniaki Honjo, Shuji Nakagawa, Hiroaki Inoue, Kazuya Ikoma, Keiichiro Ueshima, Tomohiro Matsuki, Osam Mazda, Toshikazu Kubo
    • 雑誌名

      JOURNAL OF ORTHOPAEDIC RESEARCH

      巻: 32(8) ページ: 975-980

    • DOI

      10.1002/jor.22623

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] The anabolic effects of HIF-1α-induced HSP70 in rabbit articular chondrocyte under hypoxic conditions2015

    • 著者名/発表者名
      Shohei Ichimaru, Shinji Tsuchida, Yuji Arai, Shuji Nakagawa, Hiroaki Inoue, Tomohiro Matsuki, Kuniaki Honjo, Keiichiro Ueshima, Osam Mazda, Toshikazu Kubo
    • 学会等名
      Orthopaedic Research Society 2015 annual meeting
    • 発表場所
      Las Vegas
    • 年月日
      2015-03-28 – 2015-03-31

URL: 

公開日: 2016-05-27  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi