| 研究課題/領域番号 |
26462551
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
川島 慶之 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (10376759)
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| 研究分担者 |
野口 佳裕 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 講師 (50282752)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 内耳有毛細胞 / TMC1 / TMC2 / アミノグリコシド系抗菌薬 / 機械電気変換イオンチャネル |
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| 研究実績の概要 |
The Jackson Laboratory より Tmc1 ノックアウトマウス(B6.129-Tmc1tm1.1Ajg/J, Tmc1Δ/+)およ びTmc2ノックアウトマウス(B6.129-Tmc2tm1.1Ajg/J, Tmc2Δ/+)を購入した。遺伝子型の確定のため、Tmc1+、Tmc1Δ、Tmc2+、Tmc2Δに対するプライマーを作製した。Tmc1Δ/+マウスを交配しTmc1Δ/Δマウスを、Tmc2Δ/+マウスを交配しTmc2Δ/Δマウスを作製した。聴性脳幹反応検査および耳音響検査を用いてTmc1Δ/Δマウスが難聴を示すことを確認した。Tmc1Δ/ΔマウスとTmc2Δ/Δマウスを交配してTmc1Δ/+；Tmc2Δ/+マウスを作製した。Tmc1Δ/+；Tmc2Δ/+マウスとTmc1Δ/+；Tmc2Δ/+マウスを交配し、ダブルノックアウトマウス（Tmc1Δ/Δ；Tmc2Δ/Δ）、Tmc1Δ/+；Tmc2Δ/Δ、Tmc1Δ/Δ；Tmc2Δ/+マウスを作製中である。一方、アミノグリコシドの内耳毒性に対し保護作用を持つと報告されているFM1-43のin vitroでの至適濃度を検討している。生後早期の野生型のC57BL/6Jより採取した内耳の感覚上皮を外植し、ゲンタマイシンの濃度、暴露時間、FM1-43濃度、培養時間など幾つかの条件を試し、FM1-43がアミノグリコシドの内耳毒性に対し保護作用を示す条件を検討中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
目的の遺伝子型を持つ実験動物作製のために時間を要し、in vivoでの実験が開始できていないため。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初の計画通り、in vivoでの実験を進めていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
目的の遺伝子型を持つ実験動物作製が遅れており、in vivoでの実験に必要な試薬も購入していないため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
in vivoでの実験に必要な試薬を購入する。
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