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2015 年度 実施状況報告書

難聴モデルマウス前庭の形態・機能評価と前庭を標的とした遺伝子導入の検討

研究課題

研究課題/領域番号 26462567
研究機関順天堂大学

研究代表者

岡田 弘子  順天堂大学, 医学部, 助教 (20433774)

研究分担者 神谷 和作  順天堂大学, 医学部, 准教授 (10374159)
飯塚 崇  順天堂大学, 医学部, 助教 (40372932)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード前庭機能 / Gjb2
研究実績の概要

コントロールマウス(C57BL/6)、Cx26-R75W変異を有するトランスジェニックマウス(Cx26R75W+)、コンディショナルノックアウトマウス(Cx26cKO)の3群において、幼若・成熟・老齢の前庭組織を摘出し、光学顕微鏡により有毛細胞不動毛の形態・支持細胞の形態学的解析を行った。現在のところは各群間での形態的な差異を認めなかった。また、コントロールマウス(C57BL/6)、R75W変位を有するCx26cKOの3群において、幼弱・成熟・老齢における前庭機能を評価した。現時点では各群での平衡機能検査間での有意差は認められていない。
Cx26cKOへのGJB2搭載アデノ随伴ウィルスへの投与を検討したところ、正円窓への投与、および半規管からの投与において前庭有毛細胞周囲の支持細胞への遺伝子導入が観察された。また、半規管からのウィルス液の還流法では大量のウィルス液を液循環により投与できるため、蝸牛頂部まで広範囲での遺伝子導入が可能であった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

遺伝子改変モデル動物の分子病態解析(Kamiya,2014, J Clin Invest)、GJB2遺伝子治療(Iizuka, 2015, Human Moleculare Genetics)いずれにおいても有意義な成果を挙げることができたため。

今後の研究の推進方策

遺伝子改変モデル動物の分子病態解析(Kamiya,2014, J Clin Invest)、GJB2遺伝子治療(Iizuka, 2015, Human Moleculare Genetics)いずれにおいても有意義な成果を挙げることができたが、今後はこれらの成果をもとにして前庭の病態メカニズムを解明し、遺伝子治療によって予防、改善が可能な有効な治療法を確立することを目指す。

次年度使用額が生じた理由

予定していた試薬の購入を備蓄品の使用で代用し、予定金額を使用しなかったため。

次年度使用額の使用計画

今後は毎月、会計担当者と共に残額の確認と使用資金の検討を行うことにより効率的に試薬消耗品の購入を行い、研究課題が最大限に円滑に進むための運用計画を遂行する。

  • 研究成果

    (19件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 4件、 謝辞記載あり 3件) 学会発表 (14件) (うち国際学会 10件)

  • [雑誌論文] Postnatal Development and Maturation of the Vestibular Organ in Dominant-Negative Connexin 26 Transgenic Mouse.2015

    • 著者名/発表者名
      Hiroko Okada, Kazusaku Kamiya., Takashi Iizuka and Katsuhisa Ikeda.
    • 雑誌名

      J Otol Rhinol

      巻: S1 ページ: 37-40

    • DOI

      10.4172/2324-8785.S1-009

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26 Deficient Mice.2015

    • 著者名/発表者名
      Anzai, T., Fukunaga, I., Hatakeyama, K., Fujimoto, A., Kobayashi, K., Nishikawa, A., Aoki, T., Noda, T., Minowa, O., Ikeda, K., and Kamiya, K
    • 雑誌名

      PloS one

      巻: 10 ページ: e0141258

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0141258.

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Differentiation of iPS Cells to Cochlear Cells are Regulated Depending on the Part of Co-cultured Organs.2015

    • 著者名/発表者名
      Kazusaku Kamiya, Keiko Karasawa, Kazuma Kobayashi, Asuka Miwa and Katsuhisa Ikeda.
    • 雑誌名

      J Otol Rhinol

      巻: S1 ページ: 34-36

    • DOI

      10.4172/2324-8785.S1-008

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Perinatal Gjb2 gene transfer rescues hearing in a mouse model of hereditary deafness.2015

    • 著者名/発表者名
      Iizuka, T., Kamiya, K., Gotoh, S., Sugitani, Y., Suzuki, M., Noda, T., Minowa, O., and Ikeda, K.
    • 雑誌名

      Human molecular genetics

      巻: 24 ページ: 3651-3661

    • DOI

      10.1093/hmg/ddv109.

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Connexin26 regulates assembly and maintenance of cochlear gap junction macromolecular complex for normal hearing2015

    • 著者名/発表者名
      Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama and Katsuhisa Ikeda
    • 雑誌名

      AIP Conference Proceedings

      巻: 1703 ページ: 30018;1-3

    • DOI

      10.1063/1.4939333

    • 謝辞記載あり
  • [学会発表] GJB2変異遺伝性難聴に対する細胞治療・遺伝子治療法の開発2016

    • 著者名/発表者名
      神谷 和作
    • 学会等名
      第15回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      大阪国際会議場(大阪市)
    • 年月日
      2016-03-17 – 2016-03-19
  • [学会発表] iPS細胞からのConnexin26発現細胞への分化誘導と細胞間ギャップ結合プラークの構築2016

    • 著者名/発表者名
      福永一朗、畠山佳欧里、 青木徹、藤本あゆみ、 西川貴菜、美野輪治、 池田 勝久、神谷和作
    • 学会等名
      第15回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      大阪国際会議場(大阪市)
    • 年月日
      2016-03-17 – 2016-03-19
  • [学会発表] コネキシン26欠損マウスからのiPS細胞の樹立2016

    • 著者名/発表者名
      青木徹、福永一朗、 畠山佳欧里、藤本あゆみ、西川貴菜、美野輪治、 池田勝久、神谷和作
    • 学会等名
      第15回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      大阪国際会議場(大阪市)
    • 年月日
      2016-03-17 – 2016-03-19
  • [学会発表] 内耳フィーダー細胞を用いたiPS細胞の分化誘導によるCx26ギャップ結合形成細胞の樹立2016

    • 著者名/発表者名
      藤本あゆみ、福永一朗、 畠山佳欧里、青木徹、 西川貴菜、池田勝久、 神谷 和作
    • 学会等名
      第15回日本再生医療学会総会
    • 発表場所
      大阪国際会議場(大阪市)
    • 年月日
      2016-03-17 – 2016-03-19
  • [学会発表] Restoration og Cochlear Gap Junction for GJB22016

    • 著者名/発表者名
      Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Deformation of the Outer Hair Cells and the Accumulation of Caveolin-2 in Connexin 26-Deficient Mice2016

    • 著者名/発表者名
      Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Generation of induced pluripoten stem cells form connexin26 conditional knock out mouce2016

    • 著者名/発表者名
      Toru Aoki, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque2016

    • 著者名/発表者名
      Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Atena Nishikawa, Ayumi Fujimoto, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Induction of iPS cell differentiation into Connexin26 positive cells with gap junction plaques using cochlear feeder cell2016

    • 著者名/発表者名
      Ayumi Fujimoto, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Atena Nishikawa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Various cochlear gap junction plaque reproduced in human cell line2016

    • 著者名/発表者名
      Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      Association for Research in Otolaryngology (ARO), 39th Annual MidWinter Meeting
    • 発表場所
      Manchester Grand Hyatt, San Diego, CA, USA
    • 年月日
      2016-02-20 – 2016-02-24
    • 国際学会
  • [学会発表] Cochlear gap junction plaque, stabilized macromolecular complex composed of specific connexins2015

    • 著者名/発表者名
      Kazusaku Kamiya, Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama, Toru Aoki, Ayumi Fujimoto, Atena Nishikawa ,Takashi Anzai, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda
    • 学会等名
      52nd Inner Ear Biology Workshop
    • 発表場所
      Campus of the Catholic University of Rome, Italy
    • 年月日
      2015-09-12 – 2015-09-15
    • 国際学会
  • [学会発表] Caveolins accumulates at the organ of Corti in GJB2 associated deafness2015

    • 著者名/発表者名
      Takashi Anzai, Kazusaku Kamiya, Katsuhisa Ikeda
    • 学会等名
      52nd Inner Ear Biology Workshop
    • 発表場所
      Campus of the Catholic University of Rome, Italy
    • 年月日
      2015-09-12 – 2015-09-15
    • 国際学会
  • [学会発表] Reproduction of various types of cochlear gap junction plaques in human cell line2015

    • 著者名/発表者名
      Kaori Hatakeyama, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      52nd Inner Ear Biology Workshop
    • 発表場所
      Campus of the Catholic University of Rome, Italy
    • 年月日
      2015-09-12 – 2015-09-15
    • 国際学会
  • [学会発表] Differentiation of mouse iPS cell into Cx26-positive cell and formation of inter cellular Cx26-gap junction plaque2015

    • 著者名/発表者名
      Ichiro Fukunaga, Kaori Hatakeyama,Toru Aoki, Atena Nishikawa, Ayumi Fujimoto, Osamu Minowa, Katsuhisa Ikeda, Kazusaku Kamiya
    • 学会等名
      52nd Inner Ear Biology Workshop
    • 発表場所
      Campus of the Catholic University of Rome, Italy
    • 年月日
      2015-09-12 – 2015-09-15
    • 国際学会

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公開日: 2017-01-06  

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