| 研究実績の概要 |
今回はMPLの粘膜アジュバント効果についてin Vitroにおいて検証を行なっている。実験動物はSPF下にて飼育した、雄性、 6週令、BALB/cマウスを用いた。マウス脾臓から、CD11c MicroBeadsによりMagnetic cell sorterを用いてCD11c陽性樹状細胞をpositive selectionを行い分離し、RPMI1640培地にて培養を行なった。MPL 0μg、10 μg、20 μgを異なった量により樹状細胞培養液に加えたのちに、6、12、24時間後に培養液を採取分離した。上清からは樹状細胞からのサイトカイン産生についてBio-Plex Pro™ Mouse Cytokine Assaysを用いてTh1/2 各種サイトカイン濃度を測定し、沈殿した細胞からはRNAを抽出したのちに各種サイトカインにおけるサイトカインmRNAの発現について計測を行なった。MPL付加により、培養上清中のTNF-α, IL-10濃度が明らかに対象と比して増加しており、TNF-α濃度は経時的に減少するものの、IL-10濃度は経時的に増加していた。TNF-α, IL-10 mRNAの発現においても同様の経過を認めた。TNF-αは樹状細胞による抗原呈示を促進し、制御性T細胞の活性を抑制することが知られており、IL-10はエンドトキシンなどの毒素活性を減弱することが知られており、MPL投与により、樹状細胞におけるTNF-αによる抗原呈示能の活性化とIL-10による炎症反応の抑制を来すものと考えられ、MPLをアジュバントとして用いた粘膜免疫において過剰な免疫応答を抑制しつつ、効率よく獲得免疫を誘導するものと推測された。
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