| 研究課題/領域番号 |
26462690
|
|---|
| 研究機関 | 愛媛大学 |
|---|
研究代表者 |
大橋 裕一 愛媛大学, 本部, 学長 (00116005)
|
|---|
| 研究分担者 |
林 康人 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (70314953)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | ケラトサイト / バイオイメージング / 骨髄細胞 / 再生医療 / Fucci |
|---|
| 研究実績の概要 |
Keratocan-IRES2-nls-CreノックインマウスF1雄とROSA26mT/mGによる交配により得られた、Keratocan-IRES2-nls-Cre /ROSA26mT/mGはケラトサイトにおいてCreの発現が確認され、ケラトサイト特異的なバイオイメージングが可能であることが示された。Keratocan-IRES2-nls-Cre /ROSA26mT/mG においては、ケラトサイトの細胞質の形態が従来、信じられていたものとはかなり異なることや、上皮欠損作製後にはケラトサイトが崩壊し、上皮被覆後に再増殖することが経時的に観察できている。この再増殖を詳細に検討するために、細胞周期のバイオイメージングを可能にするsingle allele組織特異的Fucci2（G1） （S/G2/M）マウス：ROSA26 (CAG -loxP -pgkNeo -loxP -mVenus -hGeminin (1-110) -IRES2 -mcherry - hCdt1 (30-120)の作製にも成功した。上皮被覆後の再増殖では局所で増殖周期の細胞の比率が高く、増殖環境が重要であることが示唆された。骨髄線維芽細胞の移植と増殖周期のイメージングを両立させるべく、青蛍光のCreレポーターマウス(ROSA26mR/mB)の作製を現在行っている。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ROSA26 (CAG -loxP -pgkNeo -loxP -mVenus -hGeminin (1-110) -IRES2 -mcherry - hCdt1 (30-120)の機能解析は順調に進んでおり、概ね順調であると考えている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
ROSA26 (CAG -loxP -pgkNeo -loxP -mVenus -hGeminin (1-110) -IRES2 -mcherry - hCdt1 (30-120) / ROSA26 mR/mB /Keratocan -IRES2 -nls -Creを作製し、増殖しているケラトサイトの形態の変化を経時観察する。Keratocan-IRES2-nls-Cre /ROSA26 mT/mG骨髄由来線維芽細胞をKeratocan-IRES2-nls-Cre /ROSA26 mR/mBマウス角膜実質内に移植し、宿主のケラトサイトと骨髄由来線維芽細胞の細胞間の関係を明らかにする。
|
