ヒトCD133陽性神経芽腫幹細胞を標的とした新規治療法の開発

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26462705
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 吉田 英生 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (60210712)
• 研究分担者: 齋藤 武 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (20406044) ; 光永 哲也 千葉大学, 医学部附属病院, その他 (80375774) [辞退] ; 上條 岳彦 埼玉県立がんセンター(臨床腫瘍研究所), 臨床腫瘍研究所, 所長 (90262708) ; 照井 慶太 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (70375773) ; 中田 光政 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (90375775)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 小児腫瘍学 / 神経芽腫 / がん幹細胞

研究実績の概要

平成29年度は多くの神経芽腫の発生部位である神経節および副腎において、CD133を高発現するモデルマウスを作成した。
CD133を高発現させるためのtransgenic (Tg) ベクターは、CAGプロモーター下にlox P配列と終止コドンを挿入し、ヒトCD133のcDNAと連結した、組織特異的に発現可能なものを使用した。ベクターは、マウスES細胞でのRosa26領域に相同組換えを行い、そのES細胞を用いてTgマウス (CAG-lox-hCD133)を作出した。また、神経節および副腎において、Tgを発現させるため、ドーパミン脱水素酵素 (DBH) プロモーターにCreを連結したマウス (DBH-Cre) を理研から入手した。
DBH-CreマウスとCAG-lox-hCD133マウスを交配し、両アレルを有する二重ヘテロF1マウスは、神経節および副腎においてヒトCD133を高発現することが期待される。作出したF1マウスを、生後2ヶ月の段階において解剖し、副腎 (Adrenal gland) を回収した。副腎の外見からは、大きさおよび構造に違いは見られていない。回収した副腎での遺伝子発現を確認するため、RT-PCRとウェスタンブロットを行ったところ、ヒトCD133の高発現が確認された。継続して同二重ヘテロF1マウスを飼育し、自然発症腫瘍を検出していく。さらに、神経芽腫の原因遺伝子であるMYCNを発現するCAG-lox-MYCNマウスとの掛け合わせによる神経芽腫癌幹細胞モデルマウス構築を検討したい

研究成果

• [雑誌論文] Invariant natural killer T infiltration in neuroblastoma with favorable outcome. (2018)
  • 著者名/発表者名: Hishiki T, Mise N, Harada K, Ihara F, Takami M, Saito T, Terui K, Nakata M, Komatsu S, Yoshida H, Motohashi S.
  • 雑誌名: Pediatric Surgery International 巻: 34 ページ: 195-201
  • DOI: 10.1007/s00383-017-4189-x.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequency and proliferative response of circulating invariant natural killer T cells in pediatric patients with malignant solid tumors. (2018)
  • 著者名/発表者名: Hishiki T, Mise N, Harada K, Ihara F, Takami M, Saito T, Terui K, Nakata M, Komatsu S, Yoshida H, Motohashi S.
  • 雑誌名: Pediatric Surgery International 巻: 34 ページ: 169-176
  • DOI: 10.1007/s00383-017-4185-1.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction of respiratory collapse among pediatric patients with mediastinal tumors during induction of general anesthesia. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawaguchi Y, Saito T, Mitsunaga T, Terui K, Nakata M, Matsuura G, Kouchi K, Yoshida H.
  • 雑誌名: Journal of Pediatric Surgery 巻: - ページ: 30612-7
  • DOI: 10.1016/j.jpedsurg.2017.09.013.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 小児悪性固形腫瘍経験者のトランジションの現状 施設経験 (2017)
  • 著者名/発表者名: 光永 哲也, 齋藤 武, 照井 慶太, 中田 光政, 小原 由紀子, 三瀬 直子, 川口 雄之亮, 吉田 英生
  • 雑誌名: 日本小児血液・がん学会雑誌 巻: 53 ページ: 448-452
  • DOI: 10.11412/jspho.53.448
  • 査読あり
• [学会発表] 肺転移を伴った肝芽腫に対する治療方針の妥当性の検討(Validity of the treatment policy for hepatoblastoma with lung metastasis) (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakata Mitsuyuki, Hishiki Tomoro, Saito Takeshi, Terui Keita, Komatsu Shugo, Kakuda Harumi, Ochiai Hidemasa, Hino Moeko, Shibata Ryohei, Harada Kazuaki, Kobayashi Masahumi, Shinno Yoshitaka, Oita Satoru, Katsumata Yoshio, Nishimura Takahiro, Ando Kumiko, Taneyama Yuichi, Hurudate Kazuki, Yoshida Hideo
  • 学会等名: 第59回日本小児血液・がん学会学術集会
• [学会発表] 胎児・新生児副腎嚢胞性病変30例の鑑別診断 (2017)
  • 著者名/発表者名: 中田光政，岩井 潤，幸地克憲，齋藤 武，照井慶太，光永哲也，武之内史子，松浦 玄，小松秀吾，吉田英生
  • 学会等名: 第54回日本小児外科学会学術集会
• [学会発表] 再発神経芽腫に対してエクソーム解析を行った一例 (2017)
  • 著者名/発表者名: 秦 佳孝, 春田 雅之, 杉野 隆一, 大平 美紀, 中田 光政, 菱木 知郎, 吉田 英生, 上條 岳彦
  • 学会等名: 第59回日本小児血液・がん学会学術集会
• [学会発表] 神経芽腫4S症例の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 小松 秀吾, 齋藤 武, 照井 慶太, 中田 光政, 柴田 涼平, 小林 真史, 原田 和明, 勝俣 善夫, 西村 善夫, 西村 雄宏, 勝海 大輔, 吉田 英生
  • 学会等名: 第59回日本小児血液・がん学会学術集会
• [学会発表] 神経芽腫細胞による樹状細胞への抑制効果の検討(Soluble factors derived from neuroblastoma cell line suppress dendritic cell differentiation and activation) (2017)
  • 著者名/発表者名: Harada Kazuaki(Department of Pediatric Surgery, Graduate School of Medicine, Chiba University), Saito Takeshi, Terui Keita, Nakata Mitsuyuki, Komatsu Shugo, Shibata Ryohei, Kobayashi Masafumi, Katsumata Yoshio, Nishimura Katsuhiro, Katsumi Daisuke, Takami Mariko, Motahasi Shinichiro, Yoshida Hideo
  • 学会等名: 第59回日本小児血液・がん学会学術集会