| 研究課題/領域番号 |
26462761
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| 研究機関 | 関西医科大学 |
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研究代表者 |
中嶋 康文 関西医科大学, 医学部, 教授 (70326239)
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| 研究分担者 |
佐和 貞治 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10206013)
石井 祥代 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40457958)
溝部 俊樹 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50239266)
小川 覚 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50636131)
中山 力恒 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90568198)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 遺伝子治療 |
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| 研究実績の概要 |
救急患者や手術患者に、体外循環装置を長時間使用すると血小板が活性化する。我々は、人工心肺下心臓手術周術期に惹起される炎症病態に及ぼす血小板由来microRNA (miRNA) の役割に関してIn Vivo, In Vitro両面から探索する事を主眼に置いている。また、本研究の実験結果が解明することにより、活性化血小板から放出されるマイクロパーティクルに特に豊富に含有しているとされるmiRNA産生を抑制することで、心臓血管周術期の炎症を制御する可能性を探索する。
本年度においては、3時間程度以上の人工心肺時間が予想される心臓外科予定手術患者において、周術期の血小板内及び血漿内に存在するマイクロパーチクルのmicroRNAの発現変化を次世代シーケンサーを用いて、網羅的発現解析を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
次世代シーケンサーを用いた実験系の実験手技の安定化に時間を要したが、概ね順調に実験進行している。
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| 今後の研究の推進方策 |
周術期に変化のあった血小板内、及びマイクロパーチクルのmicroRNAの網羅的発現解析を、パスウエイ解析、主成分分析等の多変量解析を用いることで、microRNAのターゲットとなる標的遺伝子群の細胞内情報伝達系に及ぼすmicroRNAの役割が解析出来ると考える。また、その中で炎症、細胞死に関連する遺伝子に影響を及ぼす可能性があると考えている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
来年度は、次世代シーケンサーによるmicroRNAの網羅的発現解析で絞り込まれたmicroRNAに関して、リアルタイムPCR法でより定量的な発現解析をする予定である。
また、炎症、細胞死に関連するmicroRNAが候補となった場合、血管内皮培養細胞であるHMEC-1細胞に、microRNAを遺伝子導入する事で、以下に変化するかを実験解析する予定である。
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| 次年度使用額の使用計画 |
主に、実験消耗品代、情報収集のための学会参加費に使用予定である。
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