| 研究課題/領域番号 |
26462761
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| 研究機関 | 関西医科大学 |
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研究代表者 |
中嶋 康文 関西医科大学, 医学部, 教授 (70326239)
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| 研究分担者 |
佐和 貞治 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10206013)
石井 祥代 京都府立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (40457958)
溝部 俊樹 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50239266)
小川 覚 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50636131)
中山 力恒 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (90568198)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 遺伝子治療 |
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| 研究実績の概要 |
救急患者や手術患者に、体外循環装置を長時間使用すると血小板が活性化する。我々は、人工心肺下心臓手術周術期に惹起される炎症病態に及ぼす血小板由来microRNA (miRNA) の役割に関してIn Vivo, In Vitro両面から探索する事を主眼に置いている。
また、本研究の実験結果が解明することにより、活性化血小板から放出されるマイクロパーティクルに特に豊富に含有しているとされるmiRNA産生を抑制することで、心臓血管周術期の炎症を制御する可能性を示唆し、今後の遺伝子治療の研究展開をしたい。
去年度において、miRNAの安定採取及び実験プロコール作成に時間を費やしたが、本年度においては、安定的に人工心肺下心臓手術予定患者の血小板と血漿中のmiRNA発現の周術期の経時的変化を次世代シーケンサー用いて、網羅的及び定量解析することに成功した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初は、周術期の変化に統計学的に有意のあったマイクロRNAをリアルタイムPCR法を用いて、定量化する予定であったが、この実験系に関しては、遂行できていないため。
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| 今後の研究の推進方策 |
血小板由来の血漿中に放出されたmiRNAで、統計学的に有意に変化のたったmiRNAが他の血球細胞、血管内皮細胞にもたらす相互作用で、主に炎症惹起、消退作用の影響をIn Vitroで、解析する予定にしている。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
来年度は、炎症、細胞死に関連するmicroRNAを、血管内皮培養細胞であるHMEC-1細胞に、遺伝子導入する事で、どのように変化するかを実験解析する予定である。
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| 次年度使用額の使用計画 |
Nulcleofection法を用いた遺伝子導入関連試薬、ペプチド、PCR関連品、イ、ELISAキット、培養関連品等の実験消耗品に使用予定である。
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