| 研究課題/領域番号 |
26462793
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| 研究機関 | 北海道医療大学 |
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研究代表者 |
中澤 太 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (60115053)
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| 研究分担者 |
宮川 博史 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (30219729)
藤田 真理 北海道医療大学, 歯学部, 助教 (50405669)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | Oral biofilm / Oral Veillonella / V. tobetsuensis, / periodontitis / ﾄﾞﾗﾌﾄｹﾞﾉﾑｼｰｸｴﾝｽ |
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| 研究実績の概要 |
ﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑの初期形成に関する本研究の遂行によって、これまでに以下の内容を明らかにした。
１）金属ﾁﾀﾝ表面への口腔細菌の初期付着は、ﾗｸﾄﾌｪﾘﾝのｺｰﾃィﾝｸﾞによって阻止される。２）ﾅﾀ豆からのｱﾙｺｰﾙ抽出液には、ﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成抑制効果があり、ﾏｳｽを用いた歯周病誘発in vivo実験においても、口腔ﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ量の減少のみならず、歯槽骨吸収の抑制が認められた。３）歯周病の原因細菌の１つであるPorphyromonas gigivalisのﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成には、近縁のPrevotella orisとの共凝集が重要な役割を担っている。４）重篤な歯周病の歯周ﾎﾟｹｯﾄは、軽度の歯周ﾎﾟｹｯﾄに比較してVeillonella parvulaの分布と出現頻度が高いことから、歯周病の進行へのV. parvulaの関与が示唆された。５）Veillonella tobetsuensisが共存した場合、Streptococcus属のﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成が最も促進された。６）ﾃﾞﾝﾀﾙﾕﾆｯﾄの水ﾊﾟｲﾌﾟﾗｲﾝ中のﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑの除去に、poseidonｼｽﾃﾑによって作成される電解水が極めて有効である。７）Veillonella tobetsuensisが培地中に産生するautoincucer-2様の物質が、Streptococcusによるﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成を抑制した。８）Veillonella tobetsuensisのﾄﾞﾗﾌﾄｹﾞﾉﾑｼｰｸｴﾝｽを明らかにした。９）ﾊｲﾋﾞｽｶｽの花弁からのｱﾙｺｰﾙ抽出物が、複数の口腔細菌によるﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成を抑制した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
これまでの研究成果に基づき、以下の研究を遂行中である。１）StreptococcusとVeillonellaが形成するﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑについて：健常者の口腔において最も分離頻度が高いStreptococcus属細菌種はS. salivariusで、Veillonella属細菌種としては、V. rogosaeである。また、S. salivariusはｼｮ糖を基質として水溶性ﾌﾙｸﾀﾝ（多糖体の１種）を産生することが知られている。そこで、この２菌種によるﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成機序を明らかにするために、添加するｼｮ糖や２菌種を共培養する時期と量比を変化させ、ﾊﾞｲｵﾌｨﾙﾑ形成量や浮遊菌量、更に水溶性ﾌﾙｸﾀﾝの産生量を経時的に測定する。２）Veillonella属の新菌種の確立について：これまでの臨床試料を用いた研究過程で、Veillonella属特異的ﾌﾟﾗｰﾏｰでは典型的なPCR産物を作るが、既報のVeillonella属細菌種に特異的なﾌﾟﾗｲﾏｰを用いたPCRでは産物を示さない菌株を複数分離している。これらはVeillonella属の新菌種と推定されることから、16S rRNA, rpoB, dnaK等のｼｰｸｴﾝｽ解析の他、細胞壁の脂肪酸構成や生化学的性状を明らかにし、新菌種として確立する。３）ﾀｲの学童の口腔細菌叢について（Mahidol大学との国際共同研究）：ﾀｲの学童から舌垢及び唾液を採取した試料を用い、それらから分離されるVeillonellaを菌種ﾚﾍﾞﾙで同定し、各菌種の分布と出現頻度を明らかにする。
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| 今後の研究の推進方策 |
１．食文化などによる口腔細菌叢の違い：１）日本の学童から舌垢及び唾液を採取し、それらから分離されるVeillonellaを菌種ﾚﾍﾞﾙで同定し、各菌種の分布と出現頻度を明らかにする。２）その結果と上記３）の結果を比較検討し、食文化等によるVeillonella属細菌種の分布と出現頻度を明らかにする。
２．唾液試料のﾒﾀｹﾞﾉﾑ解析：１）ﾀｲの学童から採取した唾液試料中のﾒﾀｹﾞﾉﾑ解析を行う。２）日本の学童からも唾液を採取して、同様にﾒﾀｹﾞﾉﾑ解析を行う。３）日本とﾀｲの学童の唾液のﾒﾀｹﾞﾉﾑ解析を比較検討し、食文化などによる学童の細菌叢の違いを解析する。
３．口腔清掃状態と細菌叢：それぞれの国の採取した学童を、口腔清掃状態によって、良い群、中程度群、悪い群の３群に分類する。上記１．及び２．の結果を、口腔清掃状態の違いによる３群毎に詳細に解析し、日本およびﾀｲの学童における口腔清掃状態と１）Veillonella属細菌種の分布や出現頻度との関連性、２）全細菌叢との関連性、を明らかにする。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
メタゲノムの依頼解析が終了せず、支払が遅れたため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度にメタゲノムの依頼解析が終了するので、支払う予定。
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