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2014 年度 実施状況報告書

歯周病細菌外膜ヴェシクルの免疫病理と異菌種外膜ヴェシクル間相互作用に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 26462866
研究機関国立感染症研究所

研究代表者

中尾 龍馬  国立感染症研究所, その他部局等, 主任研究官 (10370959)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード外膜ヴェシクル / 粘膜免疫 / 歯周病
研究実績の概要

グラム陰性菌は直径20-200nm程度の小胞を菌体外に産生する。これを外膜ヴェシクルとよぶ。
歯周病細菌Porphyromonas gingivalisの外膜ヴェシクルを二次元電気泳動で展開し二次元マップ上の53スポットをLC-MS/MS解析にて同定した。さらに二次元展開した抗原をPVDF膜上に転写し、外膜ヴェシクルにより経鼻免疫したマウス血清を当てたところ、LPSおよびジンジパインをはじめとするA-LPS修飾タンパク等、幾つかのイムノドミナント抗原を同定することができた。
また、P. gingivalis、大腸菌、髄膜炎菌の外膜ヴェシクルに対するマウスの粘膜免疫応答を調べた。いずれの種由来外膜ヴェシクルとも、TLR3アゴニストとの同時投与により、血中および唾液中に多くの菌特異的イムノグロブリンの産生を誘導することが可能であった。また、血清中はIgGが主体であるが、そのサブタイプは同じ外膜ヴェシクルであっても、PgはIgG1、大腸菌と髄膜炎菌はIgG2aが豊富であった。以上より、ヴェシクルの誘導する免疫型は、種によって異なることが明らかとなった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

歯周病細菌等の外膜ヴェシクルの免疫学的な役割が明らかになってきているため。

今後の研究の推進方策

外膜ヴェシクルの免疫原性、免疫病理、免疫型などを明らかにし、外膜ヴェシクルと疾患形成とのかかわりを明らかにする。また外膜ヴェシクルの予防・治療的応用の可能性について検討する。

次年度使用額が生じた理由

2015年3月末から4月頭にかけ、国際学会に出張したが、この経費は来年度の研究費で支払いをする予定であるため。

次年度使用額の使用計画

3月~4月の国際学会(Keystone Symposia, Tahoe, CA)発表旅費として約40万円を計上する予定。それ以外は当初予定と変わりない。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 謝辞記載あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (6件)

  • [雑誌論文] Immunoreactive antigens recognized in serum samples from mice intranasally immunized with Porphyromonas gingivalis outer membrane vesicles2015

    • 著者名/発表者名
      Bai D, Nakao R, Ito A, Uematsu H, Senpuku H
    • 雑誌名

      Pathogens and Disease

      巻: 73(3) ページ: ftu006

    • DOI

      10.1093/femspd/ftu006

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] A Novel Approach for Purification and Selective Capture of Membrane Vesicles of the Periodontopathic Bacterium, Porphyromonas gingivalis: Membrane Vesicles Bind to Magnetic Beads Coated with Epoxy Groups in a Noncovalent, Species-Specific Manner.2014

    • 著者名/発表者名
      Nakao R, Kikushima K, Higuchi H, Obana N, Nomura N, Bai D, Ohnishi M, Senpuku H.
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 9(5) ページ: e95137

    • DOI

      doi: 10.1371/journal.pone.0095137

    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 高速原子間力顕微鏡を用いた大腸菌からの外膜ヴェシクルの放出2015

    • 著者名/発表者名
      菊島健児、中尾龍馬
    • 学会等名
      第88回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      岐阜
    • 年月日
      2015-03-26 – 2015-03-28
  • [学会発表] ウェルシュ菌が産生するメンブランベシクルは宿主の免疫応答を誘導する2015

    • 著者名/発表者名
      永山恭子、尾花 望、中尾龍馬、泉福英信、中村幸治、野村暢彦
    • 学会等名
      第88回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      岐阜
    • 年月日
      2015-03-26 – 2015-03-28
  • [学会発表] プロポリスの歯周病原細菌に対する抗菌作用の検討2015

    • 著者名/発表者名
      吉益由莉 泉福英信 中尾龍馬
    • 学会等名
      第88回日本細菌学会総会
    • 発表場所
      岐阜
    • 年月日
      2015-03-26 – 2015-03-28
  • [学会発表] Imaging of Porphyromonas gingivalis infection using quantum dots2014

    • 著者名/発表者名
      菊島健児、中尾龍馬、樋口秀男
    • 学会等名
      第43回日本免疫学会
    • 発表場所
      京都
    • 年月日
      2014-12-10 – 2014-12-12
  • [学会発表] クロストリジウム属細菌が産生するメンブランベシクルは宿主細胞と相互作用する2014

    • 著者名/発表者名
      永山恭子、尾花 望、中尾龍馬、泉福英信、中村幸治、野村暢彦
    • 学会等名
      環境微生物系学会合同大会2014
    • 発表場所
      浜松
    • 年月日
      2014-10-21 – 2014-10-24
  • [学会発表] Outer membrane vesicles of Porphyromonas gingivalis Bind to Magnetic Beads Coated with Epoxy Groups in a Noncovalnent, Species-Specific manner2014

    • 著者名/発表者名
      Ryoma Nakao, Hidenobu Senpuku
    • 学会等名
      第56回歯科基礎医学会総会
    • 発表場所
      福岡
    • 年月日
      2014-09-25 – 2014-09-27

URL: 

公開日: 2016-05-27  

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