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2015 年度 実施状況報告書

根管内細菌叢メタゲノム解析に基づく、新しい根尖性歯周炎の臨床診断法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 26462869
研究機関東北大学

研究代表者

佐藤 拓一  東北大学, 歯学研究科(研究院), 講師 (10303132)

研究分担者 真柳 弦  東北大学, 歯学研究科(研究院), 助教 (10451600)
河村 好章  愛知学院大学, 薬学部, 教授 (80262757)
田中 香お里  岐阜大学, 生命科学総合研究支援センター, 教授 (20242729)
松山 順子  新潟大学, 医歯学系, 助教 (30293236)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード歯学 / 口腔細菌 / バイオフィルム / メタゲノム / 根尖歯周炎
研究実績の概要

歯内疾患は根管内に生息する多種多様で、多量な微生物により惹起される、とされている。従って、根管内に生息する微生物を質的ならびに量的に把握することが極めて重要である。本研究では、近年、注目を集めているメタゲノム解析法を応用して、精密で、高感度な微生物検査法によって、治療対象の根管内微生物叢を、モニタリングすることを目指す。その際、根管治療に伴って、質的ならびに量的にどのように変動するかに着目する。
本年度は、感染根管内試料を対象として、効率的な質的ならびに量的解析の実験条件の検討を継続して行った。東北大学病院を受診した患者からインフォームドコンセントを得た後に、感染根管治療時に、根管象牙質を採取した(研究倫理専門委員会の承認)。根管治療用のファイルの刃部を切断し、滅菌チューブに入れ、滅菌生食水を加え、試料とした。エンドトキシンの影響を極力、排除するために、エンドトキシンフリーのチップや生食水を選択した。それにも拘わらず、蛍光により、生菌数を計数する手段では、ファイルの刃部や象牙質削片そのものの影響からか、根管充填(直前)時の試料においても、値がゼロにはならず、悩ましい結果となった(同時に行った、嫌気培養では生菌は得られず、治療効果は確実と思われた)。Pyrosequencing解析については、鋭意、遂行中であり、次年度も同様に進める予定である。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

実験結果の検討が順調に進んでいるので。

今後の研究の推進方策

今後も実験結果の結果、ならびに、実験の遂行(pyrosequencing)を進める予定である。

次年度使用額が生じた理由

本年度、実際のpyrosequencingを開始し、次年度、本格的に行うため。

次年度使用額の使用計画

次年度、本格的に、pyrosequencingを行うため、相当な費用が必要とされ、支出する予定である。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 謝辞記載あり 6件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 4件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] PCR-dipstick DNA chromatography for profiling of a subgroup of caries-associated bacterial species in plaque from healthy coronal surfaces and periodontal pockets.2016

    • 著者名/発表者名
      Tian L, Sato T, Niwa K, Kawase M, Mayanagi G, Washio J, Takahashi N
    • 雑誌名

      Biomed Res (Tokyo)

      巻: 37 ページ: 29-36

    • DOI

      https://www.jstage.jst.go.jp/browse/biomedres/37/1/_contents

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Profiling subgingival microbiota of plaque biofilms in the elderly.2016

    • 著者名/発表者名
      Abiko Y, Sato T, Sakashita R, Tomida J, Kawamura Y, Takahashi N
    • 雑誌名

      J Oral Biosci

      巻: 58 ページ: in press

    • DOI

      10.1016/j.job.2015.12.002

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Microbiota profiling of bronchial fluids of patients with pulmonary carcinoma.2015

    • 著者名/発表者名
      Ishida N, Sato T, Hoshikawa Y, Tanda N, Sasaki K, Kondo T, Takahashi N:
    • 雑誌名

      J Oral Biosci

      巻: 57 ページ: 110-117

    • DOI

      10.1016/j.job.2014.11.001

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Responses of infected dental pulp to αTCP containing antimicrobials in rat molars.2015

    • 著者名/発表者名
      Sato T, Kenmotsu S, Nakakura-Ohshima K, Takahashi N, Ohshima H
    • 雑誌名

      Arch Histol Cytol 73(4+5):

      巻: 73 ページ: 165-175

    • DOI

      http://doi.org/10.1679/aohc.73.165

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Porphyromonas bronchialis sp. nov., isolated from intraoperative bronchial fluids of a patient with non-small cell lung cancer.2015

    • 著者名/発表者名
      Sato T, Tomida J, Naka T, Fujiwara N, Hasegawa A, Hoshikawa Y, Matsuyama J, Ishida N, Kondo T, Tanaka K, Takahashi N, Kawamura Y
    • 雑誌名

      Tohoku J Exp Med

      巻: 237 ページ: 31-37

    • DOI

      10.1620/tjem.237.31

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Oral malodorous gases and oral microbiota: From halitosis to carcinogenesis.2015

    • 著者名/発表者名
      Tanda N, Hoshikawa Y, Ishida N, Sato T, Takahashi N, Hosokawa R, Koseki T
    • 雑誌名

      J Oral Biosci

      巻: 57 ページ: 175-178

    • DOI

      10.1016/j.job.2015.05.004

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] PCR-dipstick DNA chromatography for multiplex and semi-quantitative analysis of plaque biofilm microbiota.2016

    • 著者名/発表者名
      Tian L, Sato T, Niwa K, Kawase M, Mayanagi G, Abiko Y, Washio J, Takahashi N
    • 学会等名
      Innovative Research for Biosis-Abiosis Intelligent Interface Symposium: The 6th International Symposium for Interface Oral Health Science
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      2016-01-18 – 2016-01-19
    • 国際学会
  • [学会発表] メタボローム解析:口腔疾患の発生機序解明への新たなアプローチ2015

    • 著者名/発表者名
      鷲尾純平,小川珠生,北村 淳,森島浩允,Tian Lingyang,石黒和子,真柳 弦,安彦友希,佐藤拓一,高橋信博
    • 学会等名
      第68回東北大学歯学会
    • 発表場所
      仙台市
    • 年月日
      2015-12-11
    • 招待講演
  • [学会発表] Malodorous gases from saliva of perioperative patients of lung resection.2015

    • 著者名/発表者名
      Tanda N, Ishida N, Takahashi N, Sato T, Hoshikawa Y, Hosokawa R, Koseki T
    • 学会等名
      The 63rd Annual Meeting of the Japanese Association for Dental Research
    • 発表場所
      福岡市
    • 年月日
      2015-10-31
    • 国際学会
  • [学会発表] 嫌気性無芽胞グラム陽性桿菌Olsenella spp.の薬剤感受性2015

    • 著者名/発表者名
      田中香お里,佐藤拓一,八巻惠子,林 将大,河村好章
    • 学会等名
      第63回日本化学療法学会西日本支部総会
    • 発表場所
      奈良市
    • 年月日
      2015-10-17
  • [学会発表] Profiling of microbiota from infected root canals with and without marginal leakage using anaerobic culture and molecular biological techniques (16S rRNA gene sequencing).2015

    • 著者名/発表者名
      Sato T, Yamaki K, Kawamura Y, Tomida J, Tian L, Ishida N, Takeuchi Y, Hashimoto K, Abiko Y, Matsuyama J, Takahashi N
    • 学会等名
      The 25th ECCMID (European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases)
    • 発表場所
      Copenhagen, Denmark
    • 年月日
      2015-04-25 – 2015-04-28
    • 国際学会
  • [学会発表] Antimicrobial susceptibility profiles of Helicobacter cinaedi strains isolated from patients in Japan.2015

    • 著者名/発表者名
      Tomida J, Morita Y, Sato T, Kawamura Y
    • 学会等名
      The 25th ECCMID (European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases)
    • 発表場所
      Copenhagen, Denmark
    • 年月日
      2015-04-25 – 2015-04-28
    • 国際学会

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公開日: 2017-01-06  

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