| 研究課題/領域番号 |
26462890
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
宮下 桂子 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 研究員 (50636264)
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| 研究分担者 |
徳田 雅行 鹿児島大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (20253891)
田畑 純 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (20243248)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 象牙芽細胞 / 石灰化 / アラーミン / 3D 培養 |
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| 研究実績の概要 |
水酸化カルシウムを歯髄組織に直接貼付すると「デンティンブリッジ」と呼ばれる硬組織が生じるが、その形成のメカニズムは不明な点が多い。一方、近年、組織内においては、壊死細胞から周辺細胞に向けて放出される「アラーミン」が自然免疫誘導や組織修復に関わることが明らかになってきている。
本研究はアラーミンが硬組織形成にどのように関わるかを、生体を模した 3D 培養にて明らかにすることを最終目的としている。
本年度は、マウス象牙芽細胞を用いて、アラーミンのひとつである HMGB-1 の投与実験をおこない、象牙芽細胞の石灰化が誘導されるかを調べた。0.01～10 μg/ml の HMGB-1 で 11 日間象牙芽細胞を刺激した後、Alizarin Red 染色をおこなったが、石灰化は確認されなかった。
3D 培養については、マウス象牙芽細胞を用いて予備実験をおこない、コラーゲンゲル中にて象牙芽細胞に特徴的な突起様の形態とマーカー遺伝子の発現が確認された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
象牙芽細胞を用いた 3D 培養の手法についてはほぼ確立されたが、当初想定していた HMGB-1による直接的な象牙芽細胞の石灰化が確認されなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初想定していた HMGB-1 以外のアラーミンを用いて、象牙芽細胞において石灰化が誘導されるか確認を行う。また 3D 培養で HMGB-1 の局所投与実験をおこない、直接的な石灰化誘導以外に何らかの影響を象牙芽細胞に与えるか検討する。その際、象牙芽細胞に対して石灰化誘導の働きが確認されている BMP-2 との比較検討も行う。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
HMGB-1 で直接的な石灰化誘導が確認されなかったため、当初予定していた動物実験が次年度へ持越しとなったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
HMGB-1 以外のアラーミンの投与実験もおこない、石灰化誘導能を有するか確認する。
また、HMGB-1 については RT-PCR 等を行い、石灰化以外の作用を有するか検討する。
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