| 研究実績の概要 |
鎖長65の中鎖分割ポリリン酸（Poly-P65）を自家調製して、ヒト骨髄由来の間葉系幹細胞（hBM-MSC: Human bone marrow derived mesenchymal stem cells）に作用させ、その増殖と分化に及ぼす効果について検索し、以下の結果を得た。
1.Poly-P65のhBM-MSC増殖における至適濃度の検討：
hBM-MSCをPoly-P65（0.05, 0.1, 0.2, 0.5 mM）にて24時間刺激後、BrdUを用いたcell proliferation ELISA kit (Roche Applied Science) にて細胞増殖活性測定を行った。その結果、0.1mMのPoly-P65添加群において、統計学的有意な細胞増殖が観察された。
2.Poly-P65のhBM-MSC分化に及ぼす効果の検索：
0.1 mM Poly-P65添加後、7日間培養でhBM-MSCの骨芽細胞分化マーカー（Osteocalcin, Osteopontin）の遺伝子とタンパク質発現が統計的有意に認められたが、象牙芽細胞分化マーカーのDMP-1、DSPPの発現亢進は見出せなかった。一方、石灰化マーカーであるアルカリホスファターゼ活性ならびにアリザリンレッド染色の上昇は認められなかった。さらにマトリックスメタロプロテアーゼ（MMPs）について検討した結果、 hBM-MSCに0.1 mM Poly-P65を添加し、1, 3, 5および7日間反応させたところ、hBM-MSCにはMMP-3, -13の遺伝子とタンパク質発現がみられた。また内因性のMMP阻害因子であるTIMP-1, -2の遺伝子およびタンパク質発現がみられた。MMP-13の酵素活性は、添加3日目から統計的有意な上昇を認めた一方、MMP-3活性はコントロールとほぼ同値であった。
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