| 研究課題/領域番号 |
26463094
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
住吉 久美 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (80625161)
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| 研究分担者 |
村上 隆 岡山大学, 大学病院, 講師 (00534786)
中村 政裕 岡山大学, 大学病院, 医員 (20708036)
片岡 伴記 岡山大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (50580180)
柳田 剛志 岡山大学, 大学病院, 講師 (90534793)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 非症候群性原発性萌出不全 |
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| 研究実績の概要 |
非症候群性原発性萌出不全；Primary Failure of Tooth Eruption（PFE）は、近年矯正歯科臨床において遭遇する機会が増加している疾患である。この疾患の特徴は、歯の継続的な萌出メカニズムが阻害されることにより、特に臼歯部において開咬状態を呈する結果、咀嚼・発音といった日常生活を担う上で重要な機能が阻害されることである。現在までに、PFEの原因遺伝子としてPTH1Rが同定されているものの、詳細な発生機序およびこれらを取り巻く分子調節メカニズムは未だ明らかとなっていないのが現状であることから、本研究においてはPFＥの病態に関わる分子機構の解明を目的とし研究を開始した。
まず、PFE患者が罹患部位以外の矯正治療を行う上で抜歯が必要であると診断された歯を入手することが可能であったため、患者への説明と同意を行った後、罹患未萌出歯および正常萌出歯の採取から本研究の着手を開始した。罹患未萌出歯および正常萌出歯歯根内の歯髄および周囲に存在する歯根膜組織を採取してコラゲナーゼにて処理後、10％FBS含有Medium培地にて細胞培養を行った。その後、培養・増殖後の細胞からRNAを回収し、これらのサンプル間でいかなる遺伝子発現の変化が起こっているのかをマイクロアレイ分析にて解析した結果、罹患未萌出歯および正常萌出歯間には、骨リモデリングおよび炎症機構に関連するいくつかの遺伝子に統計的な有意差があることが明らかとなった
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初予定していた抜去歯からのRNA回収およびマイクロアレイ解析までを行い、対照群間における発現遺伝子の統計的有意差を確認することができた。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後の計画としては、統計的有意差が確認された遺伝子群を用い、骨細胞・骨芽細胞・破骨細胞・歯根膜細胞といった様々な種類の細胞へ過剰発現もしくはノックダウン実験およびリコンビナントタンパクを用いた機能解析を行っていく。そのため、まず特異的に発現する遺伝子のクローニングを行い、強制発現ベクターおよびsiRNAベクターの作製を行っていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
26年度はマイクロアレイデータの解析までを主に行っており、統計的有意差が確認された遺伝子群に対する過剰発現およびノックダウン実験は27年度に行うこととしたため、次年度使用額が生じている。
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| 次年度使用額の使用計画 |
強制発現ベクター作製に使用するベクター購入および、ノックダウン実験の用いる細胞培養およびトランスフェクション試薬の購入を行う予定である。
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