脂質代謝と小胞体ストレスをつなぐCREBHの非アルコール性脂肪肝発症における役割

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26500001
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 小林 和人 筑波大学, 医学医療系, 研究員 (30455935)
• 研究分担者: 中川 嘉 筑波大学, 国際統合睡眠医科学研究機構, 准教授 (80361351)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 非アルコール性脂肪肝 / 脂質代謝

研究実績の概要

小胞体ストレスにより活性が誘導するとされている転写因子CREBHの肝臓欠損マウスは食事誘導性の非アルコール性脂肪肝の病態を悪化させることを新たに見出した。
CREBHは肝臓、小腸にのみ発現する転写因子である。しかし、現在までに全身の欠損マウスは作成されていたが、組織特異的なノックアウト(KO)マウスは作成されていなかった。本課題ではCRISPR/Cas9システムを用い、CREBH floxマウスを作成後、肝臓特異的Cre Tgマウスと交配し、肝臓特異的CREBH KO(LKO)マウスを作製した。このマウスは正常(WT)マウスと比べ、血中脂質(トリグリセライド、コレステロール、脂肪酸)で有意な高値を示した。しかし、肝臓中の脂質量には違いがなかった。LKOマウスではトリグセライドのクリアランス能が明らかにWTマウスに比べ低下していた。肝臓の遺伝子発現でLPL活性を上昇させるApoA4、ApoA5、Apoc2が低下したことに起因している。また、脂肪酸酸化の調節因子PPARa、Cpt1aが低下していたことも原因の一つと考えられた。さらにLKOマウスにメチオニン・コリン欠損食を負荷し、非アルコール性脂肪肝を発症させた。KOマウスでは正常(WT)マウスに比べ著しい脂肪肝、肝炎を呈し、肝臓でのCREBH欠損が非アルコール性脂肪肝を惹起することを明らかにした。その際、肝臓での遺伝子発現はCREBH KOマウスでは脂質合成遺伝子、炎症マーカーの発現上昇は軽微であったのに対し、繊維化マーカー(Tgfb1、Acta2、Col1a1)の増加が顕著であった。結果として、LKOマウスでは肝炎、肝障害が悪化した。

研究成果

• [雑誌論文] Hyperlipidemia and hepatitis in liver-specific CREB3L3 knockout mice generated using a one-step CRISPR/Cas9 system. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa Y, Oikawa F, Mizuno S, Ohno H, Yagishita Y, Satoh A, Osaki Y, Takei K, Kikuchi T, Han SI, Matsuzaka T, Iwasaki H, Kobayashi K, Yatoh S, Yahagi N, Isaka M, Suzuki H, Sone H, Takahashi S, Yamada N, Shimano H.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 6 ページ: 27857
  • DOI: 10.1038/srep27857.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [備考] 筑波大学 医学医療系 内分泌代謝・糖尿病内科
  • URL: http://www.u-tsukuba-endocrinology.jp/