| 研究実績の概要 |
ヒト損傷トレランス機構には二つの副経路、忠実度が低い(error-prone)損傷乗り越えDNA合成(translesion DNA synthesis, TLS)と、忠実度が高い(error-free)鋳型鎖交換反応を介したtemplate switch (TS)経路が存在し、PCNAのユビキチン化により制御される。PCNAのモノユビキチン化はTLS(error-prone)を、ポリユビキチン化はTS(error-free)を促進することから、その制御は遺伝的安定性の維持にとって極めて重要である。酵母ではPCNAのモノ/ポリユビキチン化による制御機構の概念が確立しているが、ヒト細胞ではポリユビキチン化がほとんど検出されないため、その制御機構は不明な点が多い。本年度は、昨年度に同定した脱ユビキチン酵素をコードする遺伝子をクローニングし、組換えタンパク質の精製法を確立した。複製後修復経路における生理機能を解析するために、これらの遺伝子をsiRNAで抑制した後、PCNAのユビキチン化状態等について解析した。
|
