研究課題
EGFP-53BP1マウスのトランスジェニックマウスの純系統の作成に関して、c57BL/6とのバッククロスを継続して行い、同系統のF10を得ることができて純化が完了した。このマウスを掛け合わせて、導入したトランスジーンをホモに有するマウスの作成を継続している。これまでに、EGFP-53BP1マウスから採取した海馬において、特にCA1領域で導入したEGFPの高い傾向を発する海馬神経細胞において、DNA損傷誘導によりEGFP-53BP1の蛍光集積がどのように生じるかの検討を行った。DNA損傷は、共晶点レーザー顕微鏡の405nmのレーザー光を照射することにより行った。その結果、海馬のスライス培養下では培養細胞で見られるようなDNA損傷に53BP1蛍光の集積は認められなかった。しかしながら、海馬神経細胞を組織から分離し分散培養を行ったところ、一部の細胞で培養2ー3日目からレーザー照射によって生じたDNA損傷に損傷フォーカスの形成を認めた。この結果は、組織の中での高度に分化した神経細胞では、DNA損傷後の最初の段階であるDNA損傷応答が抑制されている可能性があるが、それを分散培養下で細胞培養環境を変えることで分化段階が変化し、一部の細胞で培養細胞で認められるようなDNA損傷フォーカス形成が起こることが確認された。増殖する細胞と分化した細胞におけるDNA損傷応答の違いがあることが観察された。
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