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2014 年度 実施状況報告書

プラズモンイメージングとサブ細胞レベル磁気分離によるオートファジーの理解

研究課題

研究課題/領域番号 26600053
研究機関北陸先端科学技術大学院大学

研究代表者

前之園 信也  北陸先端科学技術大学院大学, マテリアルサイエンス研究科, 教授 (00323535)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード多機能ナノ粒子 / 超常磁性 / プラズモン散乱 / バイオイメージング / 磁気分離 / 細胞内小胞 / オートファジー / マクロピノサイトーシス
研究実績の概要

平成26年度は、磁性とプラズモン散乱特性を併有する糖鎖修飾デュアル機能ナノ粒子の創製を行う計画であった。当初の予定通り、磁性とプラズモン特性を兼ね備えたFePt@Au@Agダブルシェル型ナノ粒子やAg@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子を開発し、その表面をラクトースを導入したポリリジンで被覆した糖鎖修飾デュアル機能ナノ粒子を創製した。特に、Ag@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子は、磁性およびプラズモン散乱特性の両面において優れており、この粒子を用いてリポソームの磁気泳動およびプラズモンイメージングを行った。この実験結果から、細胞内小胞のリアルタイムイメージングと磁気分離が原理的に可能であるということを確認した。さらに、A431細胞を用いてマクロピノサイトーシスによって細胞内へ、Ag@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子を取り込ませることが可能であることも確認した。
Ag@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子に関する一連の研究成果は、Full PaperとしてLangmuir誌に掲載されたほか、アメリカ材料科学会(MRS)、欧州材料科学会(E-MRS)、国際材料学会連合アジア国際会議(IUMRS-ICA)など計6件の国際学会発表及び7件の国内学会発表として結実している。学会発表に関する特筆すべき事柄としては、2014年8月に福岡で開催されたIUMRS-ICA2014での研究奨励賞受賞、及び2014年11月にベトナムで開催されたIWAMSN2014でのベストポスター賞受賞が挙げられる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

1: 当初の計画以上に進展している

理由

第一の理由は、当初磁性-プラズモンデュアル機能ナノ粒子としてFePt@Agコアシェル型ナノ粒子やFePt@Au@Agダブルシェル型ナノ粒子のみを予定していたが、それらに加え、さらに優れた性能を有するAg@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子の創製に成功したことにある。
第二の理由としては、細胞内小胞のモデルとしてリポソームを用い、磁気泳動実験やプラズモンイメージング実験を既に実施し、細胞内小胞のリアルタイムイメージングと磁気分離が原理的に可能であるということを当初予定より前倒しで確認したことが挙げられる。
第三の理由は、当初の計画には含まれていなかったものの、A431細胞を用いてマクロピノサイトーシスによって細胞内への取り込みが可能であることを確認した点にある。

今後の研究の推進方策

平成27年度は、リポフェクション法による磁性-プラズモンデュアル機能ナノ粒子の哺乳培養細胞の細胞質への送達技術の確立に注力する。リポフェクションの際、ラクトースをナノ粒子と共存させる(ラクトースを導入したポリマーで表面修飾したナノ粒子を用いることのほかに、ラクトースそのものを遊離分子としてナノ粒子と混合することも考えている)ことで、初期エンドソームのruptureが起きれば、その時にラクトースが細胞質に漏出し、オートファジーを誘導できると考えている。また並行して、マクロファージを用いたファゴサイトーシスによるナノ粒子の取り込み実験も計画している。その際、IgGで表面修飾したナノ粒子を用いる必要があるため、ナノ粒子表面に特異的なタンパク質を結合させたナノ粒子の作製技術の開発も行う。バイオサイエンスへの幅広い応用を考えた時、おそらくこれが極めて重要な技術となると思われる。
平成28年度以降には、実際に哺乳培養細胞内へナノ粒子を導入し、オートファジーの動態イメージングと磁気分離を行う。単離したオートファゴソームはプロテオーム解析に供してオートファゴソームに存在するタンパク質のプロファイリングを行う。

次年度使用額が生じた理由

消耗品を予定より安価で調達できたため、僅かながら未使用額(\1,581)が生じた。

次年度使用額の使用計画

Ag@FeCo@Agダブルシェル型ナノ粒子の合成に関する実験のための有機溶媒(ヘキサン)の購入に充てる。

  • 研究成果

    (15件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (12件) (うち招待講演 1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Ag/FeCo/Ag Core/Shell/Shell Magnetic Nanoparticles with Plasmonic Imaging Capability2015

    • 著者名/発表者名
      Mari Takahashi, Priyank Mohan, Akiko Nakade, Koichi Higashimine, Derrick Mott, Tsutomu Hamada, Kazuaki Matsumura, Tomohiko Taguchi, and Shinya Maenosono
    • 雑誌名

      Langmuir

      巻: 31 ページ: 2228-2236

    • DOI

      10.1021/la5046805

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Formation Mechanism of Magnetic-Plasmonic Ag@FeCo@Ag Core-Shell-Shell Nanoparticles: Fact is More Interesting Than Fiction2015

    • 著者名/発表者名
      Mari Takahashi, Koichi Higashimine, Priyank Mohan, Derrick Mott, and Shinya Maenosono
    • 雑誌名

      CrystEngComm

      巻: 17 ページ: 6923-6929

    • DOI

      10.1039/c5ce00394f

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] コロイド化学的手法によるヘテロ構造ナノ粒子の合成2015

    • 著者名/発表者名
      前之園 信也
    • 学会等名
      応用物理学会第62回春季講演会
    • 発表場所
      東海大学湘南キャンパス, 神奈川県 平塚市
    • 年月日
      2015-03-11 – 2015-03-14
    • 招待講演
  • [学会発表] Surface Functionalization of Magnetic-Plasmonic Nanoparticles with Poly-L-Lysine based Polymer for Cell Targeting and Imaging2014

    • 著者名/発表者名
      R. Rastogi, M. Takahashi, P. Mohan, D. Mott, K. Matsumura, and S. Maenosono
    • 学会等名
      The 2014 MRS Fall Meeting
    • 発表場所
      Boston, USA
    • 年月日
      2014-11-30 – 2014-12-05
  • [学会発表] Targeting of HepG2 Cells using Lactose Modified Magneto-Plasmonic Nanoparticles towards Magnetic Separation with Optical Detection2014

    • 著者名/発表者名
      R. Rastogi, M. Takahashi, P. Mohan, D. Mott, K. Matsumura, and S. Maenosono
    • 学会等名
      The 2014 MRS Fall Meeting
    • 発表場所
      Boston, USA
    • 年月日
      2014-11-30 – 2014-12-05
  • [学会発表] Investigation of the Effect of Polyol Amount on FeCo@Ag Magnetic-Plasmonic Hybrid Nanoparticle Synthesis2014

    • 著者名/発表者名
      M. Takahashi, R. Rastogi, P. Mohan, D. Mott, and S. Maenosono
    • 学会等名
      The 2014 MRS Fall Meeting
    • 発表場所
      Boston, USA
    • 年月日
      2014-11-30 – 2014-12-05
  • [学会発表] 細胞内小胞の磁気分離に向けた磁性-プラズモンへテロ構造ナノ粒子の合成及び特性評価2014

    • 著者名/発表者名
      高橋 麻里, R. Rastogi, 寺坂 慎平, P. Mohan, 武田 裕一, 中出 暁子, D. Mott, 濱田 勉, 松村 和明, 田口 友彦, 前之園 信也
    • 学会等名
      第36回日本バイオマテリアル学会大会
    • 発表場所
      タワーホール船堀, 東京都 江戸川区
    • 年月日
      2014-11-17 – 2014-11-18
  • [学会発表] Magnetic Cell Separation using FeCo-Ag Magnetic-Plasmonic Hybrid Nanoparticles2014

    • 著者名/発表者名
      R. Rastogi, 高橋 麻里, P. Mohan, D. Mott, 平塚 祐一, 松村 和明, 前之園 信也
    • 学会等名
      第36回日本バイオマテリアル学会大会
    • 発表場所
      タワーホール船堀, 東京都 江戸川区
    • 年月日
      2014-11-17 – 2014-11-18
  • [学会発表] Magnetic-Plasmonic Ag@FeCo@Ag Double-Shell Nanoparticles as Novel Bioprobes2014

    • 著者名/発表者名
      M. Takahashi, R. Rastogi, S. Terasaka, P. Mohan, Y. Takeda, A. Nakade, D. Mott, T. Hamada, K. Matsumura, T. Taguchi, and S. Maenosono
    • 学会等名
      The 7th International Workshop on Advanced Materials Science and Nanotechnology (IWAMSN 2014)
    • 発表場所
      Halong City, Vietnam
    • 年月日
      2014-11-02 – 2014-11-06
  • [学会発表] 細胞小胞のイメージングと単離を目的とした磁性-プラズモンハイブリッドナノ粒子の合成と特性評価2014

    • 著者名/発表者名
      高橋 麻里, R. Rastogi, 寺坂 慎平, P. Mohan, 中出 暁子, D. Mott, 濱田 勉, 松村 和明, 田口 友彦, 前之園 信也
    • 学会等名
      第65回コロイドおよび界面化学討論会
    • 発表場所
      東京理科大学, 東京都 新宿区
    • 年月日
      2014-09-03 – 2014-09-05
  • [学会発表] Magnetic Separation of HepG2 Cells using Lactose-Modified Magnetic-Plasmonic Hybrid Nanoparticles2014

    • 著者名/発表者名
      R. Rastogi, M. Takahashi, D. Mott, K. Matsumura, and S. Maenosono
    • 学会等名
      第65回コロイドおよび界面化学討論会
    • 発表場所
      東京理科大学, 東京都 新宿区
    • 年月日
      2014-09-03 – 2014-09-05
  • [学会発表] Magnetic Core-Plasmonic Shell Dual Functional Nanoparticles as a Novel Cellular Probe for Bioapplications2014

    • 著者名/発表者名
      M. Takahashi, R. Rastogi, A. Nakade, D. Mott, K. Matsumura, T. Hamada, T. Taguchi, and S. Maenosono
    • 学会等名
      The 15th IUMRS-International Conference in Asia (IUMRS-ICA 2014)
    • 発表場所
      Fukuoka University, Fukuoka, Japan
    • 年月日
      2014-08-24 – 2014-08-30
  • [学会発表] Magnetic-Plasmonic Heterostructured Nanoparticles as a Novel Cellular Probe for Bioapplications2014

    • 著者名/発表者名
      M. Takahashi, P. Mohan, D. Mott, K. Matsumura, A. Nakade, T. Hamada, T. Taguchi, and S. Maenosono
    • 学会等名
      UK Colloids 2014
    • 発表場所
      London, UK
    • 年月日
      2014-07-06 – 2014-07-09
  • [学会発表] Magnetic Core-Plasmonic Shell Dual Functional Nanoparticles as a Novel Cellular Probe for Bioapplications2014

    • 著者名/発表者名
      M. Takahashi, P. Mohan, D. Mott, K. Matsumura, A. Nakade, T. Hamada, and S. Maenosono
    • 学会等名
      E-MRS 2014 Spring Meeting
    • 発表場所
      Lille, France
    • 年月日
      2014-05-26 – 2014-05-30
  • [産業財産権] 金属複合体粒子及びその製造方法2015

    • 発明者名
      前之園 信也, 高橋 麻里
    • 権利者名
      新日鉄住金化学株式会社
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2015-31559
    • 出願年月日
      2015-02-20

URL: 

公開日: 2016-05-27  

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