重水素同位体シフトを用いるタンパク質側鎖間水素結合ダイナミクス解析

2015 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 26650023
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 楯 真一 広島大学, 理学(系)研究科(研究院), 教授 (20216998)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: NMR / プロリン異性化酵素 / 重水素同位体シフト / 安定同位体 / タンパク質 / 酵素

研究成果の概要

NMRシグナルに対する重水度同位体シフトを利用して，プロリン異性化酵素Pin1の酵素ドメインであるPPIaseドメインの活性部位に形成される水素結合ネットワークのダイナミクス解析を行った．重水素同位体シフトの変化から，ネットワーク中の水素結合強度の変化を簡便かつ明瞭に計測することに本研究の特徴がある．
PPIaseドメインの活性残基C113に対して３つの異なるアミノ酸変異を導入し，それぞれの変異体の異性化速度変化と，活性部位の水素結合ネットワーク変化の相関を解析した．同様に，活性部位から離れた位置にあるS138残基についても変異を導入し，活性と水素結合ネットワーク安定性の相関を解析した．

自由記述の分野

生物物理化学