研究課題
ワカレオタマボヤは成体でもオタマジャクシ型をしており、我々ヒトを含む脊索動物に共通な体制を持ちながら、体を構成する細胞数が少なく、5日という短い世代時間をもつなど、他の脊索動物にない多くの特性を備えている。本研究では、このオタマボヤにトランスポゾンをもちいた技術を適用し、発生遺伝学的な研究を可能にすることを目的とした。トランスポゼース7種 (Sleeping beauty, Minos, Tol2, piggyBac, Ac/DS, Space invador, TcBuster)のmRNAを卵巣に顕微注入し翻訳されたタンパクを可視化して調べたが、翻訳はほとんど起こっていなかった。他の種類のmRNAを注入した場合には、効率よく翻訳される場合とされない場合があることがわかった。なぜ、トランスポゼースの全てが翻訳されないメンバーに含まれてしまうのかの原因は不明である。オタマボヤでは母性mRNAの多くにトランスプライスリーダー配列がついていることから、トランスポゼースのmRNAにトランスプライスリーダー配列を付けて発現効率を見ると、翻訳効率は上昇していた。これを用いてトランスジェニック体の作成を試みたが、レポーター遺伝子のトランジェントな発現が見られるもの次世代に導入DNAが受け継がれることはなかった。オタマボヤのゲノムは非常に小さく(70 Mb)、外来のDNAがゲノムに入らないようにするための拒絶機構が強く働いているものと思われた。トランスポゾンを用いた変異体形成は上記の理由によりうまくいっていないが、遺伝子の機能を抑制する新たなしくみとしてDNAiがオタマボヤで機能することがわかった。これを用いて、母性遺伝子産物に関して網羅的なスクリーニングを行い、胚発生にとって重要な働きをする8個の遺伝子を発見することができた。これに関して論文作成を進めている。
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すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 2件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (13件) (うち国際学会 6件、 招待講演 1件) 備考 (1件)
Nucleic Acids Res.
巻: 44 ページ: D808-D818
10.1093/nar/gkv966
Genesis
巻: 53 ページ: 1-14
10.1002/dvg.22822
BMC Bioinformatics
巻: 16 ページ: 114
10.1186/s12859-015-0552-x
Proc. R. Soc. B
巻: 282 ページ: 20150435
10.1098/rspb.2015.0435
Dev. Genes Evol.
巻: 225 ページ: 149-159
10.1007/s00427-015-0502-7
Developmental Cell
巻: 35 ページ: 333-343
10.1016/j.devcel.2015.10.012
http://www.bio.sci.osaka-u.ac.jp/bio_web/lab_page/nishida/index.html