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2016 年度 実績報告書

コンディショナルノックアウトシステムの導入によりイモリの再生能力を解明する

研究課題

研究課題/領域番号 26650082
研究機関鳥取大学

研究代表者

竹内 隆  鳥取大学, 医学部, 教授 (70197268)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワードイベリアトゲイモリ / 心筋細胞 / 再生 / トランスジェニック / 細胞系譜 / コンディショナルノックアウト / CRE-loxP / IR-LEGO
研究実績の概要

本研究の目的は、イモリを用いた遺伝子コンディショナルノックアウトシステムおよび遺伝子発現誘導システムを確立することにより、イモリが有する広範な再生能力がどのような遺伝子の働きにより成立するのかを解明する研究基盤を構築することにある。さらにその実験系を用いて、イモリの心臓再生における、心筋細胞の増殖の意義を解明することをめざす。これらの目的を達成するために、(1)コンディショナルノックアウトイモリの作製と、その手法の効率化、(2)IR-LEGO(赤外レーザー利用)法による局所的な遺伝子の発現誘導法の確立、(3)細胞増殖の再生時期特異的阻害および活性化により再生への影響を解析する実験を計画、実施してきた。
今年度は昨年に引き続き、コンディショナルノックアウトイモリを作製するために、イモリCDK1遺伝子のイントロン領域に対するloxP配列の挿入実験を行った。その結果、不完全な形ではあるがCDKの遺伝子座にloxP配列を挿入することができた。現在は挿入効率を高めるための技術的改良を行っている。IR-LEGO(赤外レーザー利用)法による局所的な遺伝子の発現誘導法については、これまで使用してきた野生型熱ショックプロモーターの改良を行ったことにより、実験上の問題であった遺伝子の発現リークを押さえることに成功した。また、昨年度クローニングに成功したイモリcyclin D1遺伝子の転写調節領域について、異なる種間での機能の共通性と違いを比較解析するために、マウスのcyclin D1遺伝子の転写調節領域を導入したレポーターイモリを作製した。これにより、マウスとイモリの転写調節領域の直接的な機能比較を行った。
これらの研究成果に関連して、論文2報、学会等の発表8件(すべて招待講演)を行った。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2017 2016 その他

すべて 雑誌論文 (2件) 学会発表 (8件) (うち国際学会 1件、 招待講演 8件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] イモリをマウスと結ぶための新しい実験モデル2016

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、竹内 隆
    • 雑誌名

      生体の科学

      巻: 67 ページ: 264-269

  • [雑誌論文] 再生生物学の新時代へー古くて新しいモデル生物イベリアトゲイモリ2016

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、竹内 隆
    • 雑誌名

      実験医学

      巻: 34 ページ: 1473-1476

  • [学会発表] Study of cardiac regeneration using new model newt Pleurodeles waltl.2017

    • 著者名/発表者名
      Toshinori Hayashi, Ayumi Myouga, Eri Tsuchiya, Shohei Azuma, Yukio Sato and Takashi Takeuchi
    • 学会等名
      Annual meeting of the Japanese Society of Developmental Biologists Symposium
    • 発表場所
      Tower Hall Funabori, (Edogawa, Tokyo)
    • 年月日
      2017-05-10
    • 招待講演
  • [学会発表] 「再生できる動物」と「再生できない動物では何が異なるのか?2017

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、佐藤 幸夫、竹内 隆
    • 学会等名
      日本再生医療学会 高校生体験企画
    • 発表場所
      仙台国際センター(宮城県 仙台市)
    • 年月日
      2017-03-09
    • 招待講演
  • [学会発表] 新規実験モデル動物のイベリアトゲイモリが可能にする新しい再生研究2017

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、茗荷 あゆみ、東 翔平、土屋 絵莉、竹内 隆
    • 学会等名
      日本再生医療学会 シンポジウム
    • 発表場所
      仙台国際センター(宮城県 仙台市)
    • 年月日
      2017-03-08
    • 招待講演
  • [学会発表] マウスとイモリを用いた再生研究~再生能の違いは何が決めるか?2017

    • 著者名/発表者名
      竹内 隆
    • 学会等名
      CREST研究課題「細胞動態の多様性・不均一性に基づく組織構築原理の解明」研究集会 特別講演
    • 発表場所
      松江エクセルホテル東急(島根県 松江市)
    • 年月日
      2017-02-20
    • 招待講演
  • [学会発表] Cardiac regeneration in newts achieved based on the compensatory manner.2016

    • 著者名/発表者名
      Toshinori Hayashi, Ayumi Myouga, Eri Tsuchiya, Shohei Azuma Yukio Sato and Takashi Takeuchi
    • 学会等名
      ICZ/ZSJ Joint Meeting Symposium
    • 発表場所
      OIST (Onna-son, Okinawa)
    • 年月日
      2016-11-17
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] 革新的イモリ研究の創成~イベリアトゲイモリを用いて2016

    • 著者名/発表者名
      竹内 隆
    • 学会等名
      オモロイ生き物研究会
    • 発表場所
      定山渓ホテル(北海道 札幌市)
    • 年月日
      2016-10-22
    • 招待講演
  • [学会発表] イモリの再生能力を支える機構をマウスとの比較から明らかにする2016

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、竹内 隆
    • 学会等名
      ユニーク動物研究会
    • 発表場所
      基礎生物学研究所(愛知県 岡崎市)
    • 年月日
      2016-08-21
    • 招待講演
  • [学会発表] イベリアトゲイモリを用いた心臓再生における細胞増殖の制御機構の研究2016

    • 著者名/発表者名
      林 利憲、茗荷 あゆみ、土屋 絵莉、東 翔平、竹内 隆
    • 学会等名
      次世代両生類研究会
    • 発表場所
      基礎生物学研究所(愛知県 岡崎市)
    • 年月日
      2016-08-08
    • 招待講演
  • [備考] 鳥取大学医学部生命科学科生体情報額分野

    • URL

      http://www.med.tottori-u.ac.jp/biosign/5982.html

  • [備考] 鳥取大学医学部生命科学科生体情報額分野

    • URL

      https://www.facebook.com/seitai.seimei.toridai

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公開日: 2018-01-16  

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