ADAMTSプロテアーゼによる細胞移動制御におけるリボソーム蛋白質の役割

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26650086
• 研究機関: 関西学院大学
• 研究代表者: 西脇 清二 関西学院大学, 理工学部, 教授 (30342827)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: ADAMTSプロテアーゼ / リボソーム / 細胞移動 / 線虫

研究実績の概要

１．野生型およびrpl-20変異体のポリソーム解析: 線虫のADAMTSプロテアーゼであるMIG-17は生殖巣形態形成をリードするdistal tip cell (DTC)の移動を制御する。mig-17変異体ではDTCの蛇行・迷走表現型がみられ、生殖巣の形態が異常となる。興味深いことにmig-17変異体のDTC移動異常を抑制するサプレッサー変異として、リボソーム大サブユニットのコンポーネントであるrpl-20遺伝子のアミノ酸置換変異が得られた。rpl-20変異はmig-17の共同因子であるmig-18変異も抑制することができるが、DTC移動制御に関わる別のADAMTSであるgon-1の変異は抑制することはできない。平成２８年度はrpl-20変異体の生化学的解析を行った。野生型およびrpl-20(tk73)変異体からショ糖密度勾配遠心分離によりポリソーム分画を行った。その結果、rpl-20変異体では60Sサブユニットの量が野生型に比べて大きく減少していることが分かった。また、ウエスタンブロット解析からRPL-20::mCherryはリボソームに取り込まれていることを確認した。これらの結果から、tk73変異によるアミノ酸置換が60Sサブユニットの形成に影響を与えていることが分かった。野生型と変異体間でポリソームのプロファイルに大きな違いがあり、トランスクリプトーム解析を行っても意味のあるデータが得られないと予想されたため、本解析は中止した。

研究成果

• [雑誌論文] Organ Length Control by an ADAMTS Extracellular Protease in Caenorhabditis elegans (2016)
  • 著者名/発表者名: Shibata, Y., Kawakado,Y., Hori,N., Tanaka, K., Inoue, R., Takano, T., Kubota, Y., Nishiwaki,K.
  • 雑誌名: G3 巻: 6 ページ: 1449-1457
  • DOI: 10.1534/g3.116.028019
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mg2+ Extrusion from Intestinal Epithelia by CNNM Proteins Is Essential for Gonadogenesis via AMPK-TORC1 Signaling in Caenorhabditis elegans (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishii, T., Funato, Y., Hashizume, O., Yamazaki, D., Hirata, Y., Nishiwaki, K., Kono, N., Arai, H., Miki, H.
  • 雑誌名: PLoS Genetics 巻: 12 ページ: e1006276
  • DOI: 10.1371/journal.pgen.1006276
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 線虫の咽頭サイズを制御するgob-1遺伝子の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 井上領、松井那美香、井関晶太、 柴田幸政、西脇清二
  • 学会等名: 第３９回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-11-30 – 2016-12-02
• [学会発表] 線虫C. elegansにおけるROSを介した咽頭サイズ制御機構の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 足立将大、坂東里美、平本和也、加嶋紀彦、森部弘樹、柴田幸政、西脇清二
  • 学会等名: 第３９回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-11-30 – 2016-12-02
• [学会発表] 線虫のADAMTSプロテアーゼによる基底膜IV型コラーゲン制御の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中村久子、高野智美、柴田幸政、西脇清二
  • 学会等名: 第３９回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2016-11-30 – 2016-12-02
• [備考] 西脇研究室ＨＰ
  • URL: http://sci-tech.ksc.kwansei.ac.jp/~nishiwaki/