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変異能力を有し、かつSRSF1-3を発現するB細胞株を用いて、SRSF1-3の機能を gain of function解析、loss of function解析できる実験系を構築することを試みた。これまでに樹立したAIDの発現をON/OFFできるニワトリB細胞株 DT40-SWにおいてSRSF1-3をノックアウトした細胞株を樹立した。また、DT40細胞を用いて見いだしたSRSF1-3の機能の一般性を示すために、自発的に抗体遺伝子への変異を起こすヒト B 細胞リンパ腫細胞株RamosにおいてSRSF1-3 遺伝子をノックアウトした。Ramos 細胞は相同組換えを高頻度に起こさないが、RNAi では 効果的に SRSF1-3 をノックダウンできなかったため、CRISPR/Cas を用いたゲノム編集を用いて SRSF1-3 遺伝子をノックアウトした。一方、マウス B 細胞株 CH12F3-2A は、SRSF1-3 を発現しておらず変異を起こさないが、 AID 発現が誘導される刺激条件で SRSF1-3 を強制発現させることにより変異を誘導できることを見いだし、この細胞株においてもSRSF1-3のノックアウトを現在試みている。
今後は、これらの細胞株に各種変異SRSF1-3を導入してSRSF1-3の機能部位を同定する。
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