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2014 年度 実施状況報告書

黒毛和種肥育牛の肥育期間中に枝肉形質を推定する血中分泌型miRNAマーカーの探索

研究課題

研究課題/領域番号 26660215
研究機関近畿大学

研究代表者

松本 和也  近畿大学, 生物理工学部, 教授 (20298938)

研究分担者 永井 宏平  近畿大学, 生物理工学部, 講師 (70500578)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワード生物情報
研究実績の概要

肥育期間中に和牛の肥育状況を評価する管理指標を確立するため、現在我々は枝肉形質を肥育中に予測するバイオマーカータンパク質の開発を進めている。最近、ヒト体液中の分泌型マイクロRNA(miRNA)が、疾患の新たなバイオマーカーとしての可能性が報告されている。タンパク質マーカーに加えて、遺伝子発現抑制機能を有するmiRNAマーカーが開発されれば、和牛の肥育状況を統合的に理解することが可能になると考えられる。そこで、本研究では、血清中に分泌されたmiRNAに着目して肥育中に枝肉形質を予測するバイオマーカーとしての可能性を検討した。実験には、同一種雄牛の産子である黒毛和種去勢牛群(高BMSナンバー群5頭vs.低BMSナンバー群5頭)のと畜時血清を供試した。一次スクリーニングでは、5頭の血清を当量混合後Exosome分画からRNAを抽出して、マイクロRNAアレイ (Affymetrix社)を用いた網羅的スクリーニング(3回反復試験)を行った。その結果、脂肪分化に関与することが報告されているmiRNAなどがリストアップされた。現在、二次スクリーニングとして、別の個体群の血清を用いて、定量RT-PCR解析を行なっている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の実施計画に従って、分泌型miRNAの包括的マイクロアレイ解析をしたところ、枝肉形質のBMSナンバーと相関性の高い54種類のmiRNAがバイオマーカー候補として同定された。脂肪分化に関与することが報告されているmiRNAなどがリストアップされており、当初の目的を達成していると判断される。

今後の研究の推進方策

本年度まで同定されたバイオマーカーmiRNA候補(54種類)については、他個体群由来全血清及びエクソソーム分画における定量RT-PCR解析による検証を行なう。さらに、検証より絞り込んだバイオマーカーmiRNA候補については、肥育期間中の血清中miRNAのプロファイリング解析とバイオマーカーとしての実証実験に向けた基礎的知見を獲得する。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2015 2014

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] 黒毛和種肥育牛の枝肉形質バイオマーカーの探索Ⅲ:腎周囲白色脂肪組織プロテオーム解析結果に基づく肥育終了時の枝肉形質を推定するバイオマーカー候補タンパク質の同定2015

    • 著者名/発表者名
      池上春香、永井宏平、松橋珠子、小林直彦、武本淳史、吉廣卓哉、井上悦子、樋口智香、守田昂太郎、内堀翔、天野朋子、田口善智、加藤博己、入谷明、松本和也
    • 雑誌名

      日本畜産学会報

      巻: 86 ページ: 印刷中

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 黒毛和種牛の脂肪交雑度を予測する血清マイクロRNAの探索2015

    • 著者名/発表者名
      池上春香、丹羽尚人、永井宏平、塚口智将、樋口智香、守田昂太郎、松橋珠子、小林直彦、松本和也
    • 学会等名
      日本畜産学会第119回大会
    • 発表場所
      宇都宮大学(栃木県・宇都宮市)
    • 年月日
      2015-03-27 – 2015-03-30
  • [学会発表] ウシ僧帽筋のプロテオーム解析により示された筋肉内脂肪の蓄積と酸化ストレスとの関連性2014

    • 著者名/発表者名
      池上春香、永井宏平、武本淳史、内堀翔、樋口智香、守田昂太郎、塚口智将、笹子奈々恵、阿部剛、小林栄治、松本和也
    • 学会等名
      第64回関西畜産学会大会
    • 発表場所
      広島大学(広島県・東広島市)
    • 年月日
      2014-09-08 – 2014-09-09

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公開日: 2016-05-27  

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