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2014 年度 実施状況報告書

野生ライチョウ由来の新規生菌剤開発:厳しい環境に対抗する野生生物の潜在能力活用

研究課題

研究課題/領域番号 26660219
研究機関京都府立大学

研究代表者

牛田 一成  京都府立大学, 生命環境科学研究科(系), 教授 (50183017)

研究分担者 村田 浩一  日本大学, 生物資源科学部, 教授 (00339285)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワードライチョウ / 共生腸内細菌 / 下痢 / 生菌製剤
研究実績の概要

残雪期および新雪期の2回にわたり、立山町室堂平で野生ライチョウの新鮮糞便を採取した。飼育ライチョウの糞便は、横浜動物園内横浜市繁殖センターで飼養中のスバルーバルライチョウから採取した.それらから DNAを抽出し、次世代シーケンサーを用いた腸内細菌網羅解析を実施した.
さらに、ニワトリ血液寒天培地などを用いて、野生ライチョウ盲腸細菌の単離を試みた.
網羅解析の結果、野生ライチョウと飼育ライチョウでは、菌叢構成が大きく異なり、とくに野生ライチョウで卓越しているCoriobacteriaceae, Synergistaceaeに属する菌群が飼育によって失われていることが明らかとなった.飼育下では、ライチョウの細菌よりも、ニワトリ由来、ブタなど家畜由来、人に由来する可能性のある細菌が優勢であった。また野生ライチョウ新鮮糞便から、嫌気性細菌を分離する方法をほぼ確立したので、次年度は、26年度に確立した方法を中心にさらに発展させた方法で盲腸内細菌を分離する予定である.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の目的である網羅解析によるライチョウ共生細菌の推測は、達成することができた.試料採取後の保存・輸送培地については、人用に開発されたものを準用した。これまで、ニホンザルでは成功していたが、ライチョウでは保存が芳しくなく、また接種する種々の培地も哺乳類用を中心に活用したが、ライチョウ特異的な細菌の分離には成功しなかった。そこでニワトリから血液を採取し、新鮮糞便を直接塗抹する方法を適用したところ、グラム陽性連鎖球菌を分離することに成功した。この段階で、試料採取現場が、冬期による閉鎖になり、次年度に再度種々の培養法を試みることとした.

今後の研究の推進方策

26年度の結果より、野生ライチョウ特異的な細菌群の分離には、貧栄養培地での集積やニワトリ血液寒天培地への直接塗抹で対応すれば、細菌の分離の効率が高くなると予想されたので、27年度前半は、立山ライチョウから有用菌の分離を試みるとともに、孵化後の飼育ライチョウに対する接種も試みる。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2015

すべて 学会発表 (2件) (うち招待講演 1件)

  • [学会発表] 厳しい生存環境に耐える野生動物の腸内細菌ープロバイオティクスとしての応用可能性2015

    • 著者名/発表者名
      牛田一成 土田さやか
    • 学会等名
      展示動物防疫衛生シンポジウム
    • 発表場所
      宮崎市 宮崎観光ホテル
    • 年月日
      2015-03-06
    • 招待講演
  • [学会発表] 次世代シーケンサーによる立山ライチョウ 腸内細菌の網羅解析2015

    • 著者名/発表者名
      牛田一成
    • 学会等名
      ライチョウ域外保全研究会
    • 発表場所
      富山市ファミリーパーク
    • 年月日
      2015-03-02

URL: 

公開日: 2016-05-27  

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